Oct4介导小鼠原代肝细胞去分化研究

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目的 通过Oct4 介导小鼠肝细胞去分化为Sox17 阳性细胞,探索肝胰重编程新途径。方法 构建慢病毒载体pWPTOct4,包装和浓缩病毒;改良两步胶原酶灌流法分离小鼠原代肝细胞;Oct4-慢病毒浓缩液感染小鼠原代肝细胞,RT-PCR检测肝细胞及内胚层转录因子的表达。结果 通过酶切、测序鉴定,证实成功构建包含Oct4 慢病毒表达载体。感染肝细胞后,外源性Oct4 出现表达,成熟的肝细胞转录因子(Alb、Ttr、Afp) 表达下降,并表达内胚层早期标记物Sox17,而没有Oct4、Nanog 及Sox2 等
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