【摘 要】
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为探讨猪氨肽酶N（APN）作为产肠毒素性大肠杆菌F4ac的受体蛋白的可能性，根据GenBank上的猪APNmRNA序列设计合成特异性引物，从新鲜的猪小肠组织中提取总RNA并反转录成cDNA第一链，RT
【机 构】
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扬州大学兽医学院/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(30571374、30771603、31072136、31270171);江苏省属高校自然科学重大基础研究项目(08KJA230002);江苏高校优势学科建设工程资助项目(2012-09);教育部创新团队项目(IRT0978);科技部转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08006-004B)
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为探讨猪氨肽酶N（APN）作为产肠毒素性大肠杆菌F4ac的受体蛋白的可能性，根据GenBank上的猪APNmRNA序列设计合成特异性引物，从新鲜的猪小肠组织中提取总RNA并反转录成cDNA第一链，RT—PCR扩增猪APN全长基因，并分别构建真核表达和原核表达系统。结果表明：APN基因已正确插入pcDNA3．1真核表达载体和pET-28a（＋）原核表达载体，SDS-PAGE结果证明重组蛋白为包涵体，且纯化产物在儿Oku处有单一明显条带。pcD-NA3．1-APN和pET28a—TAPN双系统的成功构建以及A
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