【摘 要】
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目的 采用生物信息学方法分析预测华支睾吸虫钙调蛋白(CsCaM)基因的结构和功能,通过体内实验观察其对华支睾吸虫成虫活动能力和囊蚴脱囊的影响. 方法 利用生物信息学方法对华
【机 构】
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郑州大学附属儿童医院郑州市儿童感染和免疫重点实验室,河南郑州450018;中山大学中山医学院寄生虫学教研室;中山大学热带病防治研究教育部重点实验室
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目的 采用生物信息学方法分析预测华支睾吸虫钙调蛋白(CsCaM)基因的结构和功能,通过体内实验观察其对华支睾吸虫成虫活动能力和囊蚴脱囊的影响. 方法 利用生物信息学方法对华支睾吸虫钙调蛋白基因及其对应蛋白质的理化性质和空间构象进行预测,并通过对其他CaM序列进行同源性比对,分析该基因的进化规律.用CaM抑制剂三氟拉嗪(TFP)与华支睾吸虫成虫、囊蚴分别孵育,观察成虫活动能力以及囊蚴脱囊情况. 结果 CsCaM基因编码区在第93-543 bp,编码149个氨基酸.编码蛋白的等电点为4.14,理论相对分子质量为16.8×103.拓扑结构分析该蛋白无信号肽和跨膜区.InterProScan预测CsCaM含2个超家族,4个EF手性结构域(1个超家族含有2个EF结构域),分别位于aa21-aa33,aa57-aa69,aa94-aa106和aa130-aa142.CsCaM与其他物种CaM的同源性均在90％以上.TFP与华支睾吸虫成虫和囊蚴共孵育后,实验组成虫活动能力和囊蚴脱囊率均较对照组有所下降. 结论 CsCaM具有钙离子信号蛋白的特性,参与华支睾吸虫成虫活动和囊蚴脱囊,是华支睾吸虫生长发育过程中的重要蛋白质.
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