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摘 要：本文对头孢曲松钠精制方法进行研究。本实验对头孢羟氨结晶的温度，养晶期搅拌速度、溶析剂、结晶前期搅拌速度进行了考察。
关键词：头孢曲松钠；精制；改进
头孢曲松钠化学名称为（6R，7R）-7-[2-[（氰甲基）硫]乙酰氨基]-7-甲氧基-3-[（1-甲基-1H-四唑-5-基）硫烷基甲基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸钠盐。头孢曲松钠上市已逾30年，至今仍是临床最常用的抗菌药物之一，但不良反应时有发生。头孢曲松钠可能造成AST（GOT）升高、ALT（GPT）升高、皮疹、恶心、口腔异常感、喘鸣、眩晕、便意、耳鸣、皮肤粘膜眼综合征、中毒性表皮坏死症（Lyell综合征）、肝功能障碍、黄疸、粒细胞缺乏症、溶血性贫血、血小板减少、发热、咳嗽、呼吸困难、胸部X射线检查异常、嗜酸细胞增多等症状的间质性肺炎等不良反应。有文献报道头孢曲松钠产生不良反应可能与头孢曲松钠中杂质有关。本文对头孢曲松钠精制方法进行研究，分别对头孢羟氨结晶的温度，养晶期搅拌速度、溶析剂、结晶前期搅拌速度进行了考察。
1 仪器与试药
超纯水器water-10n实验室常用超纯水器（中科仪（北京）仪器有限公司）；HH-601超级恒温水浴（江苏金坛市亿通电子有限公司）；赛默飞Prelude SPLC全自动样品前处理及液相色谱系统（赛默飞质谱分析）；UV-2200双单色器双光束紫外/可见分光光度计（北京北分瑞利分析仪器（集团）公司）；ULABO實验室温度控制器（优莱博技术（北京）有限公司）；赛多利斯PM2.5分析天平MSA2.7S-0CE-DM（广州市深华生物技术有限公司）；STARTER 2100通用实验室pH计（奥豪斯仪器（上海）有限公司）；SCQ-1002实验室玻璃器皿批量清洗器（上海声彦超声波仪器有限公司）。头孢曲松钠对照品由中国药品生物制品检定所提供。
乙腈（嘉兴市盛德化工有限公司）、甲醇（天津市津东天正精细化学试剂厂）、磷酸（天津市津东天正精细化学试剂厂）、三乙胺（国药集团化学试剂有限公司）、四丁基氢氧化铵（国药集团化学试剂有限公司）、丙酮（天津市津东天正精细化学试剂厂）。
2 实验
2.1 溶析剂的考察
分别采用乙醇和丙酮作为溶析剂进行结晶。采用乙醇头作为溶析剂头孢曲松钠含量为百分之九十二，头孢曲松钠收率为百分之九十三，比容为3.12；采用丙酮作为溶析剂头孢曲松钠含量为百分之九十三，头孢曲松钠收率为百分之九十三，比容为2.83。实验结果表明，采用乙醇和丙酮为溶析剂收率和含量无明显差别，但采用丙酮为溶析剂头孢曲松比容较好，所以选择丙酮为溶析剂。
2.2 结晶温度的考察
分别采用十摄氏度、十五摄氏度、二十摄氏度、二十五摄氏度为结晶温度。结晶温度为十摄氏度时头孢曲松钠含量为八十六点五，收率为百分之八十七；结晶温度为十五摄氏度时头孢曲松钠含量为百分之九十一点二，收率为百分之九十一；结晶温度为二十摄氏度时头孢曲松钠含量为百分之九十二点五，收率为百分之九十二；结晶温度为二十五摄氏度时头孢曲松钠含量为百分之八十九点五，收率为百分之九十。实验结果表明结晶温度为二十五摄氏度时头孢曲松钠含量和收率最高。
2.3 结晶前期搅拌速度的考察
分别采用快速搅拌和慢速搅拌为结晶前期搅拌速度。快速搅拌时头孢曲松钠含量为百分之九十二点五，收率为百分之九十二；慢速搅拌时头孢曲松钠含量为百分之九十点一，收率为百分之九十。实验结果表明，结晶前期快速搅拌头孢曲松钠含量和收率最高。
2.4 养晶期搅拌速度的考察
分别采用快速搅拌和慢速搅拌为养晶期搅拌速度。快速搅拌时头孢曲松钠含量为百分之八十八点五，收率为百分之八十八；慢速搅拌时头孢曲松钠含量为百分之九十二点六，收率为百分之九十三。实验结果表明，养晶期慢速搅拌头孢曲松钠含量和收率最高。
3 含量测定方法
3.1 色谱条件：依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-5]。色谱柱为安捷伦Cl8规格为（4.6mm×250mm，5um）；0.005mol/L四丁基氢氧化铵溶液-乙腈（80：20）为流动相；检测波长为220nm。理论板数按头孢曲松钠峰计算应不得低于2000。
3.2 供试品溶液的制备
取头孢曲松钠，精密称取，精密加入流动相30mL，超声提取30分钟，放冷，过滤，滤液转移至50毫升容量瓶内用流动相定容，摇匀，即得。
3.3 对照品溶液的制备
精密称取头孢曲松钠对照品约10mg，用流动相溶解并稀释成每1ml中含0.1mg的溶液，作为对照溶液。
3.4 准曲线的制备
制备浓度为0.05、0.1、0.3、0.5、0.7、0.9、1.1、1.3、1.5mg·mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值A（μg）为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，头孢曲松钠对照品在0.05～1.5mg·mL-1范围内线性关系良好。
3.5 回收率试验
采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的头孢曲松钠对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量（同时测定样品含量），计算回收率。6次测定的平均回收率为99.3%，RSD为0.63%。
4 结果
本实验对头孢羟氨结晶的温度，养晶期搅拌速度、溶析剂、结晶前期搅拌速度进行了考察。最佳工艺为选择丙酮为溶析剂，结晶前期快速搅拌，养晶期慢速搅拌，结晶温度为二十五摄氏度。
参考文献
[1]李军，黄萍，谢元超，于力，单红宾.用HPLC法测定头孢曲松钠、头孢噻肟钠、头孢哌酮钠聚合物[J].中国药品标准，2002（3）.
[2]李方，胡燕锋，陈敏玲.高效液相色谱法测定人血浆中头孢曲松的含量[J].中国医院药学杂志，2006（3）.
[3]汤玮珉，薛佩华.头孢曲松钠粉针剂配液的稳定性观察[J].药学服务与研究，2002（3）.
[4]单红宾，于力，谢红艳，徐成玮，高红，许贵娥，王作江.HPLC法测定头孢菌素类药物中聚合物的含量[J].山东医药工业，2000（4）.
[5]刘英，杨淑先.高效液相色谱法测定注射用头孢曲松钠三唑巴坦钠的含量[J].中国药学杂志，2005（20）.
关键词：头孢曲松钠；精制；改进
头孢曲松钠化学名称为（6R，7R）-7-[2-[（氰甲基）硫]乙酰氨基]-7-甲氧基-3-[（1-甲基-1H-四唑-5-基）硫烷基甲基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸钠盐。头孢曲松钠上市已逾30年，至今仍是临床最常用的抗菌药物之一，但不良反应时有发生。头孢曲松钠可能造成AST（GOT）升高、ALT（GPT）升高、皮疹、恶心、口腔异常感、喘鸣、眩晕、便意、耳鸣、皮肤粘膜眼综合征、中毒性表皮坏死症（Lyell综合征）、肝功能障碍、黄疸、粒细胞缺乏症、溶血性贫血、血小板减少、发热、咳嗽、呼吸困难、胸部X射线检查异常、嗜酸细胞增多等症状的间质性肺炎等不良反应。有文献报道头孢曲松钠产生不良反应可能与头孢曲松钠中杂质有关。本文对头孢曲松钠精制方法进行研究，分别对头孢羟氨结晶的温度，养晶期搅拌速度、溶析剂、结晶前期搅拌速度进行了考察。
1 仪器与试药
超纯水器water-10n实验室常用超纯水器（中科仪（北京）仪器有限公司）；HH-601超级恒温水浴（江苏金坛市亿通电子有限公司）；赛默飞Prelude SPLC全自动样品前处理及液相色谱系统（赛默飞质谱分析）；UV-2200双单色器双光束紫外/可见分光光度计（北京北分瑞利分析仪器（集团）公司）；ULABO實验室温度控制器（优莱博技术（北京）有限公司）；赛多利斯PM2.5分析天平MSA2.7S-0CE-DM（广州市深华生物技术有限公司）；STARTER 2100通用实验室pH计（奥豪斯仪器（上海）有限公司）；SCQ-1002实验室玻璃器皿批量清洗器（上海声彦超声波仪器有限公司）。头孢曲松钠对照品由中国药品生物制品检定所提供。
乙腈（嘉兴市盛德化工有限公司）、甲醇（天津市津东天正精细化学试剂厂）、磷酸（天津市津东天正精细化学试剂厂）、三乙胺（国药集团化学试剂有限公司）、四丁基氢氧化铵（国药集团化学试剂有限公司）、丙酮（天津市津东天正精细化学试剂厂）。
2 实验
2.1 溶析剂的考察
分别采用乙醇和丙酮作为溶析剂进行结晶。采用乙醇头作为溶析剂头孢曲松钠含量为百分之九十二，头孢曲松钠收率为百分之九十三，比容为3.12；采用丙酮作为溶析剂头孢曲松钠含量为百分之九十三，头孢曲松钠收率为百分之九十三，比容为2.83。实验结果表明，采用乙醇和丙酮为溶析剂收率和含量无明显差别，但采用丙酮为溶析剂头孢曲松比容较好，所以选择丙酮为溶析剂。
2.2 结晶温度的考察
分别采用十摄氏度、十五摄氏度、二十摄氏度、二十五摄氏度为结晶温度。结晶温度为十摄氏度时头孢曲松钠含量为八十六点五，收率为百分之八十七；结晶温度为十五摄氏度时头孢曲松钠含量为百分之九十一点二，收率为百分之九十一；结晶温度为二十摄氏度时头孢曲松钠含量为百分之九十二点五，收率为百分之九十二；结晶温度为二十五摄氏度时头孢曲松钠含量为百分之八十九点五，收率为百分之九十。实验结果表明结晶温度为二十五摄氏度时头孢曲松钠含量和收率最高。
2.3 结晶前期搅拌速度的考察
分别采用快速搅拌和慢速搅拌为结晶前期搅拌速度。快速搅拌时头孢曲松钠含量为百分之九十二点五，收率为百分之九十二；慢速搅拌时头孢曲松钠含量为百分之九十点一，收率为百分之九十。实验结果表明，结晶前期快速搅拌头孢曲松钠含量和收率最高。
2.4 养晶期搅拌速度的考察
分别采用快速搅拌和慢速搅拌为养晶期搅拌速度。快速搅拌时头孢曲松钠含量为百分之八十八点五，收率为百分之八十八；慢速搅拌时头孢曲松钠含量为百分之九十二点六，收率为百分之九十三。实验结果表明，养晶期慢速搅拌头孢曲松钠含量和收率最高。
3 含量测定方法
3.1 色谱条件：依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-5]。色谱柱为安捷伦Cl8规格为（4.6mm×250mm，5um）；0.005mol/L四丁基氢氧化铵溶液-乙腈（80：20）为流动相；检测波长为220nm。理论板数按头孢曲松钠峰计算应不得低于2000。
3.2 供试品溶液的制备
取头孢曲松钠，精密称取，精密加入流动相30mL，超声提取30分钟，放冷，过滤，滤液转移至50毫升容量瓶内用流动相定容，摇匀，即得。
3.3 对照品溶液的制备
精密称取头孢曲松钠对照品约10mg，用流动相溶解并稀释成每1ml中含0.1mg的溶液，作为对照溶液。
3.4 准曲线的制备
制备浓度为0.05、0.1、0.3、0.5、0.7、0.9、1.1、1.3、1.5mg·mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值A（μg）为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，头孢曲松钠对照品在0.05～1.5mg·mL-1范围内线性关系良好。
3.5 回收率试验
采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的头孢曲松钠对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量（同时测定样品含量），计算回收率。6次测定的平均回收率为99.3%，RSD为0.63%。
4 结果
本实验对头孢羟氨结晶的温度，养晶期搅拌速度、溶析剂、结晶前期搅拌速度进行了考察。最佳工艺为选择丙酮为溶析剂，结晶前期快速搅拌，养晶期慢速搅拌，结晶温度为二十五摄氏度。
参考文献
[1]李军，黄萍，谢元超，于力，单红宾.用HPLC法测定头孢曲松钠、头孢噻肟钠、头孢哌酮钠聚合物[J].中国药品标准，2002（3）.
[2]李方，胡燕锋，陈敏玲.高效液相色谱法测定人血浆中头孢曲松的含量[J].中国医院药学杂志，2006（3）.
[3]汤玮珉，薛佩华.头孢曲松钠粉针剂配液的稳定性观察[J].药学服务与研究，2002（3）.
[4]单红宾，于力，谢红艳，徐成玮，高红，许贵娥，王作江.HPLC法测定头孢菌素类药物中聚合物的含量[J].山东医药工业，2000（4）.
[5]刘英，杨淑先.高效液相色谱法测定注射用头孢曲松钠三唑巴坦钠的含量[J].中国药学杂志，2005（20）.