【摘 要】
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目的观察当归红芪超滤物(Radix Angelicae Sinensis and Radix Hedysari,RAS-RH)增强人肝癌H22细胞对重离子~(12 )C~(6+)辐射敏感性的作用,并探讨其可能的作用机制。方法H22
【机 构】
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西北民族大学医学院,甘肃中医药大学,中国科学研究院近代物理研究所,
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目的观察当归红芪超滤物(Radix Angelicae Sinensis and Radix Hedysari,RAS-RH)增强人肝癌H22细胞对重离子~(12 )C~(6+)辐射敏感性的作用,并探讨其可能的作用机制。方法H22细胞分为空白对照组、药物组(给予RAS-RH)、辐射组(一次性给予~(12 )C~(6+)辐射)及联合组(给予RAS-RH+辐射),用CCK-8法检测RAS-RH对人肝癌H22细胞增殖抑制的影响,筛选合适的RAS-RH工作浓度;克隆集落形成实验检测RAS-RH对人肝癌H22的辐射增敏作用,筛选合适的辐射剂量;通过流式细胞仪检测RAS-RH对人肝癌H22细胞凋亡的影响,利用Western blot法检测Survivin、Caspase-9的蛋白表达水平的改变。结果RAS-RH对H22细胞的增殖抑制作用在一定的时间(0~72h)和浓度范围(0~200mg/L)内呈现时间和剂量依赖性,其细胞抑制率为20%(IC_(20))时RAS-RH的质量浓度为(117.60±2.15)mg/L,以此选定100mg/L为工作浓度;利用Prism5.0软件拟合的H22细胞生存曲线均向右下呈弧度的曲线,两条曲线明显分开呈一定的距离,联合组与辐射组相比,曲线低剂量区“肩区”缩小变窄,且各剂量点(1~10Gy)的存活率降低,2Gy时,其辐射增敏比(SER)为1.39±0.07,以此选定2Gy为辐射总剂量。联合组(100 mg/L RAS-RH+2 Gy)凋亡率高于其余3组(P<0.01);Western blot结果显示联合组的Survivin蛋白表达低于其余3组(P<0.01),而联合组的Caspase-9蛋白表达高于其余3组(P<0.01)。结论RAS-RH联合重离子~(12 )C~(6+)束对人肝癌H22细胞有辐射增敏作用,其辐射增敏机制可能通过下调凋亡抑制因子Survivin蛋白表达,上调促凋亡因子Caspase-9蛋白表达以促进细胞凋亡有关。
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