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E.coli的0r舭基因位于异柠檬酸脱氢酶激酶(aceK)基因和异柠檬酸裂解酶调节因子基因(if垠)之间。根据Ecoli基因组序列设计引物,利用PCR技术扩增了arpA基因,并将其克隆入pET-28b(+)。经IPTG诱导,ArpA蛋白可以获得高效表达。通过细菌染色体同源重组技术,构建arpA基因敲除菌株AarpAMGl655。△arpA-MG1655在葡萄糖-MOPS培养基中的生长速率和野生型E.coliMG1655的生长速率很接近,前者约是后者的95%。AarpA—MG1655在乙酸-MOPS培养基中