【摘 要】
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构建重组质粒PHIL-D2/PreS2S以研究乙肝病毒PreS2(120-146)S基因编码蛋白在毕赤酵母中的表达.通过PCR扩增获得PreS2S片段,插入含AOX1启动子的Pichia Pastoris表达载体PHIL-D2
【机 构】
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长春生物制品研究所,吉林,长春,130062
【出 处】
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第五届全国感染与免疫及生物制品学术研讨会
论文部分内容阅读
构建重组质粒PHIL-D2/PreS2S以研究乙肝病毒PreS2(120-146)S基因编码蛋白在毕赤酵母中的表达.通过PCR扩增获得PreS2S片段,插入含AOX1启动子的Pichia Pastoris表达载体PHIL-D2中,构建重组表达质粒PHIL-D2/PreS2S,转化酵母宿主菌GS115.挑取阳性克隆摇床培养,甲醇诱导表达.通过ELISA、RPHA鉴定表达产物.成功构建了PHIL-D2/PreS2S真核表达载体,经过序列分析,插入的基因为在中国流行的adr亚型.在毕赤酵母中重组载体表达了S蛋白,S蛋白的表达量为 34.9 mg/L,PreS2抗原检测为强阳性.利用毕赤酵母表达系统能够有效地表达乙型肝炎病毒的PreS2S蛋白,PreS2S蛋白具有良好的生物学活性.
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