【摘 要】
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目的 构建嵌合preSl2147位氨基酸（aa）、以全长乙肝病毒（HBV）核心抗原（HBcAg）为骨架的病毒样颗粒H2和嵌合preSlaa37-45、以截断HBcAg为骨架的病毒样颗粒H3，并对比其抗原性。方法将HBVadr血清型preSl中和表位aa2147和aa37-45分别插入到全长HBc（aa1—183）和截断HBc（8a1—144）的第78位天冬氨酸和第79位脯氨酸之间，密码子优化之后全
【机 构】
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中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肝炎室,北京102206,北京出入境检验检疫局保健中心,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肝炎室,北京102206,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肝炎室,北
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目的 构建嵌合preSl2147位氨基酸（aa）、以全长乙肝病毒（HBV）核心抗原（HBcAg）为骨架的病毒样颗粒H2和嵌合preSlaa37-45、以截断HBcAg为骨架的病毒样颗粒H3，并对比其抗原性。方法将HBVadr血清型preSl中和表位aa2147和aa37-45分别插入到全长HBc（aa1—183）和截断HBc（8a1—144）的第78位天冬氨酸和第79位脯氨酸之间，密码子优化之后全基因合成，目的片段经双酶切（NdeI和XhoI）回收后连接到同样处理的pET43．1a载体上，在大肠埃希菌E．coliBL21（DE3）中表达，精细纯化后通过电镜观察蛋白形态、ELISA以及WesternBlott检测其抗原性。结果成功构建表达质粒H2和H3，并在BL21（DE3）中高效表达和自发组装成病毒样颗粒。纯化后电镜观察H2和H3形态为二十面体立体对称样病毒样颗粒，H2为实心颗粒，直径为（31．61±1．27）nm，H3为空心颗粒，直径为（28．46±1．16）nm。统计分析可得H2直径要比H3直径大（P〈0．01）。ELISA和WesternBlott检测结果证实其插入表位preSl以及载体蛋白HBc的抗原性。结论成功获得两种嵌合HBVpreSl中和表位的病毒样颗粒，为其在疫苗研究中的应用探索奠定基础。
其他文献
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目的 建立人类疱疹病毒6型(HHV-6)荧光定量PCR检测方法,并检测临床样本.方法 根据文献合成HHV-6 U65-66基因片段的特异性引物和TaqMan探针,构建质粒制备标准品,评估该方法的特异性、灵敏度和重复性；并用该方法检测93份临床诊断为病毒性脑炎的脑脊液标本.结果 本实验检测HHV-6的灵敏度为3×10(0)拷贝/μl；标准曲线间线性关系(R2)为0.999,扩增效率为97.9％；同一
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目的 探讨兰州地区冠状病毒NL63(HCoV-NL63)在急性呼吸道感染患儿中的流行现状及临床特点.方法 收集2006年11月至2009年10月兰州大学第一附属医院急性呼吸道感染(ARTIs)患儿1169例鼻咽分泌物,应用RT-PCR方法检测HCoV-NL63以及其余7种常见呼吸道病毒:鼻病毒(HRV),呼吸道合胞病毒(RSV),偏肺病毒(hMPV),流感病毒(IFVA,IFVB)副流感病毒1-3
人双埃可病毒(human parechovirus,HPeV)最早于半世纪前被发现,起初被归为肠道病毒属,命名为埃可病毒22和23,但由于基因结构、进化关系及生长特性与肠道病毒属的其他病毒不一样而划分为新的双埃可病毒属,并重新命名为HPeV1与HPeV2[1].随着RT-PCR与病毒发现方法的广泛应用,不同型别的HPeVs陆续被报道.到目前为止,双埃可病毒属已报道包含有16种不同型别的HPeV,而
朊病毒病(prion disaese)或可传播性海绵状脑病(transmissible spongiform encephalopathies,TSEs)是一类侵袭人类及多种动物中枢神经系统的退行性脑病,潜伏期长,100％病死率.人类的朊病毒病有克-雅病(Creutzfeldt-Jacob disease,CJD),包括散发型、家族遗传型、医源型、变异型CJD(variant CJD,vCJD),
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