人连接蛋白Connexin26基因的克隆、表达及初步鉴定

来源 :热带医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xpbear

【摘要】

：

目的研究含人连接蛋白Connexin26（Cx26）基因的真核表达载体构建及其在非洲猴肾细胞（COS-7）中获得稳定、高效表达的方法。方法提取人外周血淋巴细胞RNA，经逆转录制备成cDNA，设计特异

【作者】

：

徐聪李国伟刘泽玉廖嘉伟薛攀攀谭炳炎陆家海

【机构】

：

中山大学公共卫生学院

【出处】

：

热带医学杂志

【发表日期】

：

2007年5期

【关键词】

：

遗传性耳聋 CONNEXIN26 真核表达载体基因治疗 genetic deafness Connexin26 eukaryotic expression

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目的研究含人连接蛋白Connexin26（Cx26）基因的真核表达载体构建及其在非洲猴肾细胞（COS-7）中获得稳定、高效表达的方法。方法提取人外周血淋巴细胞RNA，经逆转录制备成cDNA，设计特异性引物，用PCR方法从cDNA中扩增Cx26基因，将其定向插入真核表达载体pCI-neo中获得pCI-Cx26重组子-采用酶切法和测序法鉴定。用脂质体将pCI-Cx26转染COS-7细胞，经G418筛选，获得阳性克隆。用RT-PCR和SDS-PAGE检测对表达产物进行检测。结果从人外周血RNA制备而成的cDNA

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