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[学位论文] 作者:钮利喜,, 来源:山西大学 年份:2007
D-氨基酸作为一类手性化合物,在医药、农业和食品等领域中的用途正在被广泛而迅速地挖掘。但D-氨基酸难于从天然产物中直接获得,虽可化学合成但路线复杂、高度污染、价格昂贵。......
[学位论文] 作者:钮利喜, 来源:山西大学 年份:2004
光学活性的D-氨基酸作为一种中间体被广泛应用于半合成抗生素、多肽激素、拟除虫菊脂、杀虫剂等的合成.非天然D-氨基酸常用生物法或生物-化学法生产.底物5单替代海因首先由D-...
[学位论文] 作者:钮利喜, 来源: 年份:2004
光学活性的D-氨基酸作为一种中间体被广泛应用于半合成抗生素、多肽激素、拟除虫菊脂、杀虫剂等的合成。非天然D-氨基酸常用生物法或生物-化学法生产。底物5’单替代海因首先由D-海因酶转化为中间物N-氨甲酰-D-氨基酸,然后被N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶(DCase)......
[期刊论文] 作者:王丽俊,钮利喜, 来源:医学研究杂志 年份:2020
目的旨在构建靶向MSTN基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体,并鉴定其在小鼠体内的抑制效果。方法根据MSTN基因的mRNA序列(NM_010834.3)设计siRNA,并挑选出3条可能具有良好干...
[期刊论文] 作者:钮利喜,马师师, 来源:色谱 年份:2018
建立了利用含D-海因酶的基因工程菌转化吡啶二甲酰亚胺(PDI)生成3-氨基甲酰基-α-吡啶甲酸(α-3CP)的高效液相色谱(HPLC)检测方法。将工程菌pET3a-hyd/BL21(DE3)诱导表达后收...
[期刊论文] 作者:白琴琴,钮利喜,, 来源:医学分子生物学杂志 年份:2020
目的 构建ZIKA病毒E蛋白膜外区(E80)的原核表达质粒,对重组蛋白E80进行表达、 纯化和鉴定.方法 以重组质粒pCMV-S-ZIKA_ME为模板,利用PCR扩增E80基因片段并将其插入原核表达...
[期刊论文] 作者:钮利喜, 南晶, 石亚伟,, 来源:微生物学通报 年份:2010
对一菌两酶工程菌HC01转化底物DL-对羟基苯海因(DL-HPH)的最适条件及其细胞固定化进行了研究,HC01游离细胞转化DL-HPH的最适条件为40°C、pH7.5。通过对固定化细胞酶活力测定...
[期刊论文] 作者:赵莉霞,钮利喜,等, 来源:高技术通讯 年份:2003
按本室纯化的N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶(DCase)的N-末端氨基酸序列设计了正向引物,并在巳报道的不同来源菌株DCase的氨基酸序列同源性分析的基础上,设计了反向引物。用菌株...
[会议论文] 作者:钮利喜,李娇,南晶, 来源:泛环渤海地区(七省二市)生物化学与分子生物学会2010年学术交流会 年份:2010
D-氨基酸归属于非天然氨基酸类.存在于细胞或组织中的D-氨基酸或其衍生物约有400多种,但它们的含量甚微,难于从细胞或组织中直接提取,一般都是化学合成或生物转化而得.D-氨基酸是制药、食品、日化、农药等领域的重要原材料之一,需求量呈逐年递增趋势.生物转化方法以......
[期刊论文] 作者:孔荣,钮利喜,袁静明, 来源:化学进展 年份:2006
本文扼要介绍了当今改进酶分子性能的有效手段——分子定向进化技术的基本方法如易错PCR和DNA洗牌,以及派生的一暨新技术的原理与进展,并列举了在手性有机物合成中一些成功的实......
[期刊论文] 作者:钮利喜,石亚伟,袁静明, 来源:中国抗生素杂志 年份:2004
将菌株 SS-ori的 N-氨甲酰- D-氨基酸酰胺水解酶基因( Dcase)插入到 pMAL- c2X载体中,构建表达产物为麦芽糖结合蛋白( MBP)与 Dcase融合的重组子.该重组子在 E.coli BL21中的...
[期刊论文] 作者:孔荣,钮利喜,袁静明, 来源:山西大学学报:自然科学版 年份:2006
D-海因酶是生物转化D-型氨基酸的关键酶,在一定浓度Mn^2+存在下,经易错PCR法重复扩增,产物构建成pET—HDT重组子,并建立突变体文库.经筛选获得了内源DNA序列变异的变异株。进化酶催......
[会议论文] 作者:钮利喜,吉雪雪,李娇, 来源:第三届泛环渤海(七省二市)生物化学与分子生物学会2012年学术交流会 年份:2012
[会议论文] 作者:袁静明,钮利喜,石亚伟, 来源:第四届中国酶工程学术交流讨论会 年份:2003
作者从一株生产菌株中纯化了N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶(DCase)并测定了它的N-端氨基酸序列(MTRQKIAF).以菌株总DNA为模板进行PCR扩增获得约0.4kb的扩增产物,将其克隆测序....
[期刊论文] 作者:钮利喜 吉雪雪 李佳悦, 来源:中国科技博览 年份:2014
摘 要 实验目的 构建小鼠端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase, TERT)基因启动子调控EGFP基因表达载体,并研究其在细胞中的转录活性。实验方法 从小鼠肌肉组织中提取全基因组,以它为模板,克隆得到mTERT启动子基因(mTERTp)片段。得到的片段经Sac I/Xba I双......
[会议论文] 作者:袁静明,范俊虎,钮利喜, 来源:全国第七届工业生化学术会议 年份:2002
文章介绍了从一株生产菌株中纯化DCase,并测定了它的N-端氨基酸序列,然后以该菌株总DNA为模板,进行PCR扩增,将获得的扩增产物克隆到PGEM-T载体,进行测序....
[期刊论文] 作者:李佳悦,朱欣凯,王萍,钮利喜,, 来源:中华临床医师杂志(电子版) 年份:2015
目的:采用尾静脉接种法建立C57BL/6小鼠和KM小鼠两种黑色素瘤B16细胞肺转移动物模型,观察小鼠肺部成瘤过程,并对两种模型进行比较。制作肿瘤切片,通过HE染色分析两种肿瘤模型的组......
[期刊论文] 作者:陈云霞,钮利喜,袁静明,石亚伟, 来源:中国生物工程杂志 年份:2007
目的:研究环酰亚胺水解酶(CIH293)C-末端区残基对其底物专一性的影响。方法:通过缺失或替代获得了环酰亚胺水解酶C-末端剔除2个或3个氨基酸残基及C-末端两个Lys替代为两个Glu的突......
[期刊论文] 作者:钮利喜,陈云霞,钞建宾,袁静明,, 来源:分析化学 年份:2006
采用HPLC法,以Symmetry(C18柱(4·6mm×150mm,5μm),甲醇∶10mmol/L磷酸缓冲液(pH6·5)=5∶95(V/V)为流动相,在波长210nm检测条件下,使琥珀酰亚胺及其酶解产物琥珀酰胺酸得到...
[期刊论文] 作者:钮利喜,张学尧,石亚伟,袁静明, 来源:微生物学报 年份:2006
报道D-海因酶分子C-末端Arg残基的缺失,导致酶的解聚与稳定性的显著改变。用基因克隆、表达与纯化的方法,制备了重组D-海因酶(P479)及其C-末端残基Arg缺失的D-海因酶(P478)。SDS-PA......
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