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[期刊论文] 作者:贾士东,朱甫祥,李宏伟,贺福初,修瑞娟, 来源:卫生研究 年份:2000
以中国昆明种小鼠组织的总 RNA为模板 ,用 RT- PCR方法扩增得到小鼠内皮抑制素 (ES)c DNA,与文献报道的序列 (L 2 2 5 45 )相比 ,ES c DNA测序结果 ctg在第 2 78碱基处与文献...
[期刊论文] 作者:朱甫祥,刘炜,王孝铭,马丽英,章顺国, 来源:中国应用生理学杂志 年份:2000
再灌注损伤是一个很复杂的病理生理现象。大量证据表明再灌注损伤或细胞死亡与细胞内的钙超载有关。再灌注损伤发生与否和轻重程度 ,多认为与缺血时间的长短有关。根据我们的...
[期刊论文] 作者:朱甫祥,刘泽隆,缪静,屈慧鸽,迟晓艳,, 来源:中国细胞生物学学报 年份:2012
该文旨在探索前肽缺失的von Willebrand因子(vWF-ΔPro)对蛋白质剪接的L303E/F309S突变体凝血第八因子(FVIII)分泌的影响。将vWF-ΔPro基因与蛋白内含子融合的FVIII重链和轻...
[期刊论文] 作者:朱甫祥,刘泽隆,缪静,屈慧鸽,迟晓艳, 来源:中华医学杂志 年份:2004
目的 观察糖基化修饰对内含肽剪接的B区缺失型凝血因子Ⅷ(BDD-FⅧ)分泌的影响.方法 将含有6个潜在的天冬酰胺糖基化位点(N6)的FⅧ的B区226个氨基酸引入BDD-FⅧ重链,用双载体...
[期刊论文] 作者:朱甫祥,刘泽隆,缪静,屈慧鸽,迟晓艳, 来源:解剖学报 年份:2004
目的 探讨用RNA干扰技术下调内质网蛋白伴侣免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)的表达,对基于蛋白质剪接的双链共转凝血因子VIII (FⅧ)基因HEK293细胞分泌剪接FⅧ蛋白的量和活性的...
[期刊论文] 作者:朱甫祥,刘泽隆,缪静,屈慧鸽,迟晓艳,, 来源:药学学报 年份:2010
作者最近证明intein的蛋白质剪接技术可用于双载体转B区缺失型FVIII(BDD-FVIII)基因,在此基础上,本研究将具有促FVIII分泌作用的L303E/F309S双突变和B结构域糖基化位点引入BD...
[期刊论文] 作者:朱甫祥,刘泽隆,缪静,屈慧鸽,迟晓艳,, 来源:生物化学与生物物理进展 年份:2012
培养细胞实验表明,亮氨酸拉链通过改善内含肽(intein)的蛋白质剪接效率,提高双载体转B区缺失型凝血因子Ⅷ(BDD-FⅧ)基因细胞剪接FⅧ蛋白的分泌量和活性.本文从C57BL/6小鼠门...
[期刊论文] 作者:朱甫祥,刘泽隆,缪静,屈慧鸽,迟晓艳,, 来源:药学学报 年份:2012
为改善蛋白质反式剪接效率,将B-区缺失型FⅧ(BDD-FⅧ)重链的Tyr664和轻链的Thr1826突变为Cys,双载体共转COS-7细胞,观察了细胞内蛋白质剪接、二硫键形成和细胞培养上清液中分...
[期刊论文] 作者:朱甫祥,马丽英,王孝铭,赵铁强,李晓哲,, 来源:中国病理生理杂志 年份:1997
利用成年大鼠分离的心肌细胞氧反常模型,用新一代钙荧光探针(Fluo-3)检测细胞内游离钙浓度。对比观察了血管紧张素Ⅱ及转换酶抑制剂(巯甲丙脯酸)对钙超载的影响。结果表明前...
[期刊论文] 作者:朱甫祥,刘泽隆,缪静,屈慧鸽,迟晓艳,, 来源:中国科学:生命科学 年份:2012
体外细胞培养实验证明,双载体共转重链A2结构域Met662和轻链A3结构域Asp1828突变为Cys的B区缺失型凝血Ⅷ因子(BDD-FⅧ)基因可使共表达的重、轻链形成链间二硫键,重链的分泌水...
[期刊论文] 作者:朱甫祥,刘泽隆,缪静,屈慧鸽,迟晓艳,, 来源:中国生物化学与分子生物学报 年份:2012
本文旨在通过B区缺失型凝血因子8(BDD-FVⅢ)重、轻链间二硫键形成,改善蛋白质反式剪接效率,提高双载体转BDD-FVⅢ基因功效.将BDD-FVⅢ重链A2区的Met662和轻链A3区的Asp1828突...
[期刊论文] 作者:朱甫祥,刘泽隆,缪静,屈慧鸽,迟晓艳,, 来源:中国细胞生物学学报 年份:2010
双载体转凝血Ⅷ因子基因(FⅧ)可有效克服腺相关病毒(AAV)载体容量限制,但FⅧ重链分泌的低效性导致重、轻链分泌的不均衡。重链分泌的低效性源自其A1区存在与内质网蛋白质分子...
[期刊论文] 作者:朱甫祥,刘泽隆,缪静,屈慧鸽,迟晓艳, 来源:中华医学杂志 年份:2010
目的 观察具有促进凝血因子Ⅷ(fⅧ)重链分泌的酸性区3(AR-3)对蛋白质剪接作用连接的全长fⅧ分泌的影响.方法 以双载体转融合内含肽的全长fⅧ重链和轻链基因,并将AR-3融合于重链基因,瞬时共转培养的293细胞,用Western印迹观察转基因细胞内的蛋白质剪接;用酶联免......
[期刊论文] 作者:朱甫祥,陈光慧,付爱华,唐朝枢,周爱儒,汤健, 来源:中华血液学杂志 年份:2000
目的观察由腺病毒载体介导的前尿激酶(proUK)基因导入家兔颈动脉后的表达和对血小板在损伤动脉内膜沉积的影响。方法将proUK基因腺病毒载体局部注射入家兔右颈总动脉腔内,用野生......
[期刊论文] 作者:朱甫祥,刘泽隆,迟晓艳,屈慧鸽,刘相钦,, 来源:中国科学(C辑:生命科学) 年份:2009
以intein的蛋白反式剪接为工具,研究了运用双载体的真核细胞凝血Ⅷ因子(FⅧ)基因转移,通过翻译后剪接得到完整的功能性FⅧ蛋白.将B结构域大部分缺失(Δ761~1639)的人功能性FⅧ(BDD-FⅧ)cDNA于剪接所需保守残基Ser1657前断裂为重链和轻链,分别与106和48个氨基酸......
[期刊论文] 作者:朱甫祥,陈光慧,张晨辉,付爱华,周爱儒,汤健, 来源:高技术通讯 年份:1998
应用尿激酶原(proUK)基因重组复制缺陷型腺病毒载体,防治家兔髂动脉内膜剥脱后新生内膜的增生。结果显示:导入proUK基因三周后,血管组织内proUK基因的mR-NA及其表达产物明显高于导入野生型腺病毒对照组......
[期刊论文] 作者:朱甫祥,杨树德,刘泽隆,缪静,屈慧鸽,迟晓艳,, 来源:中国细胞生物学学报 年份:2012
用双载体转运凝血Ⅷ因子基因在甲型血友病基因治疗研究中可克服AAV毒载体容量限制,但存在重链分泌低效和链不均衡性问题。为探索重、轻链间二硫键形成对重链分泌的促进作用,...
[期刊论文] 作者:朱甫祥,杨树德,刘泽隆,缪静,屈慧鸽,迟晓艳,, 来源:生物化学与生物物理进展 年份:2012
双载体共转B区缺失型凝血因子Ⅷ(BDD-FⅧ)重链和轻链基因是克服腺相关病毒载体(AAV)容量限制的一种策略,但重链分泌的低效性产生链不均衡性,影响转基因的功效.假设重、轻链链...
[期刊论文] 作者:朱甫祥,杨树德,刘泽隆,缪静,屈慧鸽,迟晓艳,, 来源:药学学报 年份:2010
本研究采用具有促分泌作用的猪FVIII分子的A1和A3区,替换人FVIII分子的相应结构,构建人/猪嵌合体BDD-FVIII(BDD-hpFVIII),利用Ssp DnaB intein的蛋白质反式剪接功能,双载体培...
[期刊论文] 作者:朱甫祥,杨树德,刘泽隆,缪静,屈慧鸽,迟晓艳,, 来源:中国细胞生物学学报 年份:2010
凝血VⅢ因子(FVⅢ)尽管与凝血V因子具有相似的结构,但其分泌的低效性不仅限制了重组产品在甲型血友病患者中的广泛应用,也困扰基于转FVⅢ基因的基因治疗。为了提高FVⅢ的分泌...
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