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[期刊论文] 作者:杨湘越,兰小鹏,廖剑,钟智强,朱忠勇,, 来源:生物技术通讯 年份:2006
目的克隆并表达人自身抗原Sm B′。方法应用RT-PCR技术,从HL-60细胞株中克隆人自身抗原Sm B′全长基因,将PCR产物直接TA克隆、鉴定及测序,再定向克隆至pGEX-ST载体中,转入大...
[期刊论文] 作者:杨湘越,兰小鹏,廖剑,钟智强,朱忠勇, 来源:临床检验杂志 年份:2006
目的 为建立抗Sm自身抗体检测方法,自行克隆、表达和鉴定细胞核抗原Sm B’。方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从HL-60细胞株中克隆Sm B’全长基因,将PCR产物直接进行TA...
[期刊论文] 作者:颜宏利,贺燕,刘凡,杨湘越,孙树汉, 来源:第二军医大学学报 年份:2004
目的:克隆人膜联蛋白A5 cDNA并在大肠杆菌系统内作表达。方法:利用RT-PCR技术从人胎盘组织的总RNA扩增膜联蛋白A5的cDNA序列,将该基因插入GST融合表达载体pGEX-5T,在tac启动子控...
[期刊论文] 作者:杨湘越,兰小鹏,廖剑,钟智强,朱忠勇, 来源:中华检验医学杂志 年份:2004
目的研究建立用克隆、表达和鉴定人自身抗原组氨酰转移核糖核酸合成酶(HARS,亦称Jo-1抗原)检测多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)自身免疫抗体的方法.方法用逆转录聚合酶链反应(RT-PC...
[会议论文] 作者:杨湘越,兰小鹏,廖剑,钟智强,朱忠勇,, 来源:福州总医院学报 年份:2007
Jo-1抗原是组氨酰-tRNA合成酶(HARS)基因的表达产物,与多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)的发病机理有关。应用RT-PCR技术。我们在国内首次克隆表达成功人自身抗原Jo-1,为下一步建立...
[期刊论文] 作者:黄尔, 张亚彬, 王加林, 杨湘越, 兰小鹏,, 来源:中华临床医师杂志(电子版) 年份:2012
嗜麦芽窄食单胞菌是临床常见的非发酵菌,常寄居在人的皮肤、呼吸道中,由于住院患者大量使用广谱抗菌药物和免疫抑制剂,引起的感染日益增多。且其天然耐药和耐药机制复杂,给临床抗......
[期刊论文] 作者:杨湘越,张惠菊,徐秀云,兰小鹏,朱忠勇,, 来源:医学研究生学报 年份:2011
目的人自身抗原U1RNP 70K通常采用组织提取法或原核表达获得。文中用基因克隆技术,在毕赤酵母中表达人U1RNP 70K自身抗原,并建立斑点免疫金渗滤检测法。方法 PCR扩增U1RNP 70...
[期刊论文] 作者:钟智强,兰小鹏,杨湘越,张鲁榕,朱忠勇, 来源:浙江医学 年份:2009
目的 研究DcR3基因在原发性肺癌组织中扩增和表达情况,探讨该基因在原发性肺癌中过度表达的临床意义.方法 利用免疫组织化学法检测26例肺癌组织和21例肺部良性病变组织DcR3蛋...
[会议论文] 作者:杨湘越,张惠菊,徐秀云,兰小鹏,朱忠勇, 来源:第5届全国检验与临床学术会议暨国际检验与临床高峰论坛 年份:2010
[会议论文] 作者:杨湘越,张惠菊,徐秀云,兰小鹏,朱忠勇, 来源:中国工程科技论坛第115场——临床分子诊断暨第二届中国分子诊断技术大会 年份:2011
目的 人自身抗原U1RNP 70k通常采用组织提取法或原核表达获得,存在诸多问题.本研究通过基因克隆技术,首次在毕赤酵母中表达人自身抗原U1RNP 70K,并建立斑点免疫金渗滤法.经检索,国内外尚无相关研究报道.方法 PCR扩增U1RNP 70K基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构......
[期刊论文] 作者:杨湘越,兰小鹏,冯福英,吴文冰,朱忠勇, 来源: 年份:2008
目的 通过基因克隆在巴斯德毕赤酵母中表达人自身抗原Sm B'.方法 PCR扩增Sm B'基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-Sm B'.用电穿孔法转化酵母菌Sm D1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清......
[期刊论文] 作者:孙艳,兰小鹏,张鲁榕,赵猛,杨湘越,朱忠勇,, 来源:实用医学杂志 年份:2009
目的:建立一种新的双抗体夹心ELISA法,以检测血清中DcR3抗原的浓度,辅助诊断原发性肝癌。方法:探索建立DcR3双抗体夹心ELISA法最适反应条件。结果:所建立方法线性范围广、灵敏度较......
[期刊论文] 作者:贺艳,颜宏利,陆一鸣,张毅,杨湘越,孙树汉, 来源:第二军医大学学报 年份:2004
目的:在大肠杆菌中高效表达融合基因AnxB1ScuPA.方法:利用PCR技术扩增AnxB1ScuPA的融合基因,克隆至原核表达载体pET-28a;转化几种不同的宿主菌(感受态细菌BL21、Rosetta、BL2...
[期刊论文] 作者:杨湘越,兰小鹏,颜宏利,陈蕊雯,孙树汉, 来源:中国人兽共患病杂志 年份:2004
目的研究毕赤酵母重组猪囊尾蚴抗原cC1蛋白的特征变化.方法对表达产物行SDS-PAGE,FPLC离子交换层析和分子筛,等电聚焦,脱磷酸反应,N端氨基酸测序,小鼠免疫接种.结果毕赤酵母...
[期刊论文] 作者:贺全山,杨昌云,陈维中,杨湘越,戎姜凯,, 来源:药学实践杂志 年份:2007
目的:制备诺氟沙星金属盐类新化学单体及观察其体外抑菌活性。方法:以诺氟沙星及数种金属盐为原料进行化学合成,以固体培养基平板药敏试验方法对合成品作体外抑菌试验观察其活性......
[期刊论文] 作者:杨湘越,孙树汉,陈蕊雯,郭瀛军,颜宏利, 来源:中国人兽共患病杂志 年份:2002
目的 克隆并在巴斯德毕赤酵母中表达猪囊尾蚴抗原cC1。方法 用PCR法在cC1cDNA5′端引入所需限制酶位点和酵母分泌信号肽 ,与酵母表达载体pPIC9k重组 ,构建表达质粒 pPIC9k...
[会议论文] 作者:杨湘越,兰小鹏,颜宏利,陈蕊雯,孙树汉, 来源:第二届世界华人临床生化和检验医学大会暨第六届全国检验医学学术会议 年份:2004
猪囊尾蚴抗原cC1是孙树汉教授在猪囊尾蚴cCDA文库中筛选并命名的一个具有免疫保护作用的人猪共同抗原,也是一个有希望的猪囊尾蚴候选亚单位疫苗.目前已在大肠杆菌和巴斯德毕赤酵母中获得了高效表达,并对后者进行了表达条件的优化.由于毕赤酵母表达系统优于原核......
[期刊论文] 作者:杨湘越,兰小鹏,颜宏利,张毅,朱忠勇,孙树汉, 来源:中国生物工程杂志 年份:2004
采用SDS-PAGE、等电聚焦、脱磷酸反应、蛋白质N端氨基酸测序、KPTT及大鼠下腔静脉血栓形成观察,发现毕赤酵母重组Annexin32的分子特征较原核产物有了明显变化.有主、次2条带,...
[期刊论文] 作者:杨湘越, 兰小鹏, 朱忠勇, 颜宏利, 张毅, 孙树汉, 来源:福建医科大学学报 年份:2005
目的研究毕赤酵母重组膜联蛋白B1的特征变化,比较其和原核表达产物对血细胞凝集与血栓形成过程的影响.方法对毕赤酵母重组膜联蛋白B1行SDS-PAGE,等电聚焦,脱磷酸反应,蛋白质N...
[期刊论文] 作者:杨湘越,兰小鹏,吴文冰,冯福英,廖剑,朱忠勇,, 来源:医学研究生学报 年份:2006
目的:通过基因克隆在巴斯德毕赤酵母菌中表达人干燥综合征B(SS—B)抗原。方法:PCR扩增SS—B基因,与酵母菌表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k—SS—B。用电穿孔法转化酵母菌SMD......
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