目的:双歧杆菌具有一定的免疫调节作用,能刺激巨噬细胞分泌细胞因子,本研究旨在探究双歧杆菌免疫调节作用的影响因素,揭示不同干预时间,不同双歧杆菌干预浓度对细胞因子分泌的影响。方法:热灭活的双歧杆菌,调整浓度为10~8CFU/ml、10~7CFU/ml、106CFU/ml,分别干预小鼠巨噬细胞J774A.1,同时取浓度为108CFU/ml的双歧杆菌与细胞共培养24h、48h、72h,分别收集培养上清液,采用酶联免疫吸附试验检测细胞因子IL-6,IL-10,TNF-α分泌量,统计分析不同菌浓度和不同培养时间下各细胞因子分泌量的差异。结果:随着双歧杆菌浓度降低,细胞因子IL-6,IL-10,TNF-α分泌量都呈依次递减趋势,各浓度组IL-6分泌量差异具有统计学意义(p <0.05),108CFU/ml组IL-10,TNF-a虽高于10~7CFU/ml组,但差异无统计学意义,10~8CFU/ml、 10~7CFU/ml组IL-10,TNF-α分泌量都显著高于10~6CFU/ml组(p <0.01)。随着共培养时间的延长,IL-6的含量呈显著递增趋势(p <0.01),IL-10呈现先增长后下降的趋势,共培养48h后IL-10的分泌量显著高于24h和72h的分泌量(p <0.01),72h时IL-10虽较48h有所下降但仍显著高于24h时的分泌量(p <0.05),TNF-α随着干预时间的延长也呈现先增长后下降的趋势,但各组间差异无统计学意义。结论:双歧杆菌的干预浓度和干预时间对其刺激巨噬细胞产生IL-6具有显著影响,对TNF-α的分泌无显著效应,48h可能为IL-10分泌的高峰期,这也为后续进一步探究双歧杆菌免疫调节作用提供了实验基础。