【摘 要】
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[目的]通过药物在突变体、过表达、野生型拟南芥上的吸收差异,找出能被特异吸收转运的氨基酸导向农药,验证其吸收、输导与氨基酸转运蛋白的直接关系,并为导向农药的合理化设计提供思路。[方法]利用本课题组在蓖麻体系检测药物输导性方法,在野生型拟南芥上检测氨基酸农药的输导性,筛选出能根部吸收和向上输导的氨基酸农药；通过检测筛选出的药物在突变体、过表达、野生型拟南芥上的吸收差异,找出能被特异吸收转运的氨基酸导
【机 构】
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华南农业大学天然农药与化学生物学教育部重点实验室,广东,广州,510642
【出 处】
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第二届生物农药理论探索及产业化技术创新研讨会
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[目的]通过药物在突变体、过表达、野生型拟南芥上的吸收差异,找出能被特异吸收转运的氨基酸导向农药,验证其吸收、输导与氨基酸转运蛋白的直接关系,并为导向农药的合理化设计提供思路。[方法]利用本课题组在蓖麻体系检测药物输导性方法,在野生型拟南芥上检测氨基酸农药的输导性,筛选出能根部吸收和向上输导的氨基酸农药；通过检测筛选出的药物在突变体、过表达、野生型拟南芥上的吸收差异,找出能被特异吸收转运的氨基酸导向农药；利用底物竞争抑制实验,进一步验证所选氨基酸导向农药与LHT1的直接关系。[结果]以康宽为母体的氨基酸农药Y-2,通过拟南芥根部培养,检测过表达,野生型和突变体拟南芥6h根部和叶部中Y-2的含量,过表达拟南芥中的药物含量高于野生型,远远高于突变体拟南芥中药物含量,而野生型拟南芥中药物含量也高于突变体中药物含量,对三种基因型拟南芥根部和叶部含量进行单因素方差分析,认为WT、LHT1与35S过表达拟南芥根中药物含量有显著差异；底物竞争抑制实验结果表明,甘氨酸对Y-2的根部吸收有很显著的竞争性抑制作用,在叶中无抑制作用；甘氨酸浓度越高,抑制作用越明显；三种基因型拟南芥,在35S中抑制作用最显著,达到58％-70％左右；在LHT1突变体中,抑制作用不明显。[结论]在自然浓度下,拟南芥根部吸收以康宽为母体的氨基酸农药Y-2与LHT1存在着直接的关系；底物竞争抑制实验结果说明拟南芥根部吸收氨基酸农药的机制与吸收甘氨酸机制类似,甘氨酸对Y-2存在很显著的底物抑制作用,过表达LHT1会让抑制作用更显著,在LHT1突变体拟南芥中,甘氨酸对氨基酸农药影响很小,突变体拟南芥根部吸收氨基酸农药的机制受到了抑制。
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