痹肿消汤干预类风湿关节炎患者外周血单个核细胞蛋白质组学研究

来源 :2009中国中西医结合系统性红斑狼疮研究学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:stoneinhigh
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目的:观察正常人以及痹肿消汤(BZXD)干预前后的早期活动性类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells PBMCs)蛋白质的双向凝胶电泳图谱,并分析其差异表达的蛋白质,寻找RA疾病相关蛋白,分析痹肿消汤治疗类风湿关节炎可能的作用机制。 方法:选取9例早期活动期RA患者以及9名健康正常成年人对照,健康正常成年人及RA患者治疗前后分别采血10ml。痹肿消汤煎液制备:白花蛇舌草25g,肿节风30g,丹参15g,络石藤20g,骨碎补15g,苡米30g等15味中药,两煎混合,每日两次,疗程为三个月。用淋巴细胞分离液分离单个核细胞,抽提外周血单个核细胞中的蛋白,采用固相pH梯度(IPG)双向凝胶电泳(2-DE)分离正常人及RA患者PBMCs总蛋白质。凝胶经考染显色后,PDQuest图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质,对差异蛋白质点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定。同时运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法验证部分差异蛋白质。 结果:获得正常人及类风湿关节炎患者外周血单个核细胞蛋白双向凝胶电泳图谱,平均蛋白质点数分别为556、579和563,匹配率分别为89.4%、88.5%和87.3%,通过比较分析,差异表达蛋白质点数为23,选取18个点进行质谱鉴定,成功鉴定14个蛋白质,治疗前后比较,有5个蛋白质存在明显差异表达。 结论:① RA患者PBMCs存在一些差异表达的蛋白质,这些差异蛋白质可能是RA发病的内在因素:②痹肿消汤可能通过对RA病人PBMCs中某些蛋白质表达的调控达到治疗目的。
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