【摘 要】
：
OBJECTIVE To explore the inhibitory effects of hypoxia inducible factor (HIF)-dependent suicidal gene therapy system on renal cell carcinomas.METHODS The HIF-dependent recombinant adenovirus Ad-5HRE/h
【机 构】
：
Department of Radiation Medicine, Fourth Military Medical University, Xi'an 710032, China
论文部分内容阅读
OBJECTIVE To explore the inhibitory effects of hypoxia inducible factor (HIF)-dependent suicidal gene therapy system on renal cell carcinomas.METHODS The HIF-dependent recombinant adenovirus Ad-5HRE/hCMVmp-BCD was constructed by DNA recombinant technique.Western blot was used to detect HIF-dependent expression of bacterial cytosine deaminase (BCD).Cell growth inhibition assay was used to determine the sensitivity of human renal cell carcinoma 786-0 cells to 5-fluorocytosine (5-FC).Tumor xenograft growth delay assay was used to evaluate the inhibitory effects of Ad5HRE/hCMVmp-BCD/5-FC on renal cell carcinomas.RESULTS Western blot analysis demonstrated that HIF-dependent BCD protein expression was achieved in 786-0 cells infected with Ad-5HRE/hCMVmp-BCD.After infection with Ad-5HRE/hCMVmp-BCD, the sensitivity of 786-0 cells to 5-FC significantly increased.Administration of Ad-5HRE/hCMVmp-BCD/5-FC could inhibit the growth of 786-0 xenografts in nude mice.CONCLUSION HIF-dependent suicidal gene therapy system Ad-5HRE/hCMVmp-BCD/5-FC can be used as a powerful therapeutic method for renal cell carcinoma.
其他文献
目的 探讨重离子对人体淋巴细胞端粒长度的影响,从而进一步了解端粒在辐射损伤以及修复中的作用.方法 将培养人淋巴细胞按照射剂量分为0.1,0.5,1.0和2.0 Gy实验组及O Gy对照组,使用14C重离子(中国科学院近代物理研究所)照射,剂量率为0.3～0.5 Gy·min-1,实验组按照后时间分为2,12,24,48和72 h组.提取各样品基因组DNA,采用荧光实时定量PCR检测端粒相对长度,样
目的 研究肺纤维化形成过程中调节性T淋巴细胞(Treg)、循环纤维细胞及重要细胞因子变化规律,进一步探讨Treg细胞是否调节纤维细胞,调控纤维化发生.方法 25 Gy 60 Co γ射线单次照射小鼠胸腔,建立肺损伤模型；HE染色和Masson三联染色检测肺组织病理变化；酶标仪测定Ⅰ型胶原浓度；流式细胞仪测定小鼠肺实质中循环纤维细胞和肺实质、肺泡灌洗液中treg；液相悬浮芯片检测肺泡灌洗液中纤维化相
目的 了解γ射线和苯并芘对细胞次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖基转移(HPRT)基因位点的影响,探索一种用于鉴别诊断γ射线和苯并芘引起的细胞损伤的早期检测敏感指标.方法 选择年龄在24 ～ 29岁之间、近期无放射性物质接触史的3名健康男性为供血者,无菌条件下静脉取血每人16 ml,分装到16个EDTA抗凝管中,其中10个样品管进行60Coγ射线照射.中国辐射防护研究院附属医院Co-60治疗机进行γ射线照射,
目的 建立稳定敲除Tip60基因的细胞系.方法 拼接特异识别特定序列的TALEN质粒由北京大学张博教授赠送.首先根据Tip60基因序列并结合生物信息学设计TALEN质粒对；根据设计的序列拼接相应的TALEN质粒识别序列；然后将上下游识别序列分别插入TALEN质粒使得识别序列与内切酶Fok l融合表达.TALEN质粒对构建成功并测序验证后,提取质粒.采用上述质粒对共转染293细胞,共转染48h之后提
目的 本研究进一步确定真核翻译起始因子4E-结合蛋白1(4E-BP1)磷酸化在电离辐射细胞中对蛋白质翻译的调节作用以及电离辐射细胞中G2/M检查点和纺锤体结构检查点的功能,研究磷酸化4EBP1在维持细胞基因组稳定性中的作用。方法 采用shRNA技术构建4E-BP1基因沉默的细胞模型；采用60 Co γ射线室温照射处理HepG2细胞；组蛋白H3 Ser10磷酸化分子标记物(M期细胞)结合流式细胞术,
目的 探讨高功率微波(HPM)辐照对大鼠子代海马形态学的影响.方法 将成年Wistar大鼠分为雌雄2组,每组又各自随机分为假辐照组和3种不同参数辐照组,分别接受HPM发生装置全身照射后4个月,将辐照参数相同的雌性和雄性大鼠按照2∶1合笼生育子代,子代根据亲代辐照参数分为4组,每组根据雌雄分为2组.在子代大鼠2月龄时经生理盐水和多聚甲醛灌注后取脑,固定,脱水,包埋,切片,染色.一部分固定采取JEM-
目的 探讨60Co γ射线对人外周血淋巴细胞凋亡和周期的影响.方法 采用60Co γ射线照射人外周血淋巴Peng-EBV,照射剂量为0,0.2,0.6,3.0和6.0 Gy,剂量率为1.013 Gy· min-1,于照射24h后,用流式细胞仪检测细胞周期(Pl染料)和凋亡(Annexin V-FITC/PI染料)的变化.结果 (1)流式细胞术(FCM)分析显示,0,0.2,0.6,3.0和6.0
目的 研究王浆酸对辐射危害的辅助保护功能.方法 健康雄性ICR小鼠连续每日经口给予王浆酸,剂量分别为37和73(相当于人体推荐量的10倍)、220 mg· kg-1,另设辐射模型对照组.灌胃30 d后进行γ射线全身照射1次,照射后继续给予受试物,分别进行外周血白细胞计数实验,小鼠骨髓细胞DNA含量实验,血清溶血素测定实验.结果 实验前各组小鼠体重与对照组相比均无显著性差异(P＞0.05).照射后实
目的 深入研究磷酸化PTEN蛋白在DNA损伤修复中的作用.方法 以HeLa,AO-3细胞为研究对象,采用免疫荧光、蛋白印迹以及大规模染色质松弛技术,探讨核定位PTEN与DNA损伤修复的关系.结果 DNA受到损伤后磷酸化PTEN-Ser380蛋白在细胞核内富集,呈点状分布,与ATM-Ser1981和γ-H2AX有共定位.磷酸化PTEN-Ser380富集过程有独特的动力学,在DNA损伤5h后,仍能检测
目的 构建pprM DNA结合域敲除株DR1△CSP,并分析其在辐射及其他极端环境处理下的抗性变化,探讨pprM的DNA结合功能对于耐辐射奇球菌(DR)菌的辐射抗性作用。方法 (1)运用生物信息学方法对pprM基因、pprM功能结合域及PprM蛋白的理化性质、功能结合域及生物学功能等进行分析与预测。(2)利用体外overlap PCR连接和体内同源重组的方法对DR pprM基因DNA结合域进行基因