H1亚型猪流感病毒一步法实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

来源 :第五届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会2014年学术年会、中国畜牧兽医学会生物制药学分会暨中国微生物学会兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sms126
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目的:为建立一种快速、简便、准确的方法以诊断和检测H1亚型猪流感病毒. 方法:根据H1亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(hemagglutinin,HA)基因保守序列,分别设计并合成了特异性引物和TaqMan MGB探针,建立检测H1亚型SIV的一步法实时荧光定量PCR技术. 结果:结果显示,该方法的敏感性可达100copies/μL,除Hl亚型SIV外,对H3亚型、H9亚型SIV以及猪瘟病毒、猪生殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒的检测均为阴性,且应用该方法对疑似猪流感样品进行检测,其结果与病毒分离结果的符合率为92.3%. 结论:结果提示,该方法特异性强、重复性好,有望成为H1亚型SIV的一种特异、敏感、快速的定量检测方法.
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