【摘 要】
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荔枝霜疫霉病菌(Peronophythora litchii Chen ex Ko et al.)引致的霜疫霉病严重地影响了荔枝的生产和采后贮运，关于该病菌致病基因方面的研究鲜有报道，其主要限制因素之一
【机 构】
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华南农业大学资源环境学院,广州510642
【出 处】
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中国植物病理学会第十一届青年学术研讨会
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荔枝霜疫霉病菌(Peronophythora litchii Chen ex Ko et al.)引致的霜疫霉病严重地影响了荔枝的生产和采后贮运，关于该病菌致病基因方面的研究鲜有报道，其主要限制因素之一就是该菌尚缺乏遗传转化方法.本研究参考前人在疫霉遗传转化方面的研究成果，利用红色荧光蛋白RFP基因和抗遗传霉素GG418基因nptⅡ对荔枝霜疫霉菌进行遗传转化，初步建立了荔枝霜疫霉的PEG介导的原生质体转化体系.研究结果表明经龙眼叶片榨汁培养基振荡培养60-72小时的荔枝霜疫霉菌丝体，由纤维素酶cellulase和溶壁酶Lysing Enzymes酶解40-45分钟制备原生质体，再将其与构建好的载体DNA混合并在40％PEG介导下以及经两次含遗传霉素G418的胡萝卜培养基覆盖后，可以成功获得转化子；所获得的转化子不仅在含遗传霉素G418的胡萝卜培养基上转代3次以上生长正常，而且在荧光显微镜下可以清楚观察到其红色荧光蛋白基因在菌丝和孢子囊中的表达，进一步验证了转化子的稳定性.该技术的建立为今后进行荔枝霜疫霉致病机制研究做了一定的技术贮备.
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