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目的:中药龙葵(Solanumnigrum)为茄科一年生草本植物,龙葵总碱(Solanine)是从龙葵的全草或未成熟的果实中提取分离出的一种生物总碱,属于甾衍类生物碱,包含澳洲茄边碱、澳洲茄碱、茄微碱和茄达碱等多种生物碱.龙葵总碱具有抗肿瘤、升血糖、强心、抗过敏、抗菌等作用,但关于其抗肿瘤作用机制国内外鲜有报道.本实验通过对S180小鼠及H22小鼠肿瘤细胞膜Na+,K+-ATPase及Ca++,Mg++-ATPase活性的影响,来初步探讨其抗肿瘤作用的机制,为龙葵的开发和利用提供有价值的资料.方法:利用紫外可见分光光度计,测定肿瘤细胞膜钠泵及钙泵的活性.选用成熟昆明种小鼠,实验组皮下注射龙葵总碱(37.50mg/kg、18.75mg/kg、9.37mg/kg),阳性对照组皮下注射环磷酰胺30mg/kg,阴性对照组皮下注射同体积生理盐水.接瘤后连续给药7d.停药后次日,在冰台上处死小鼠,取出肿瘤细胞后,加生理盐水洗涤离心后弃上清,留下层细胞,再用生理盐水制备成一定浓度的悬液,放入匀浆器中进行细胞破碎.制备好的细胞悬液立即测定其酶活力.将紫外可见分光光度计调于660nm处测得吸光度OD值.以每小时每毫克组织蛋白的组织中ATP酶分解ATP产生lumol无机磷的量为一个ATP酶活力单位,即微克分子磷/毫克蛋白/小时(umolPi/mgprot/h).其计算公式为ATPase活力=(测定管0D值-标准管OD值)×标准管磷浓度×反应液中样品稀释倍数×6×匀浆蛋白浓度(酶促反应时间为10min,酶活力定义为1h,故乘以6).用考马斯亮兰试剂测定匀浆蛋白含量.数据用SPSS11.0进行方差分析.结果①龙葵总碱对S180小鼠肿瘤细胞膜Na+,K+-ATPase的影响:高剂量组(37.50mg/kg)和中剂量组(18.75mg/kg)酶活力分别为2.701umolpi/mgprh和3.090umolpi/mgprh,与生理盐水对照组酶活力3.800umolpi/mgprh比较有非常显著性差异(P＜0.01);而低剂量组(9.37mg/kg)酶活力为3.670umolpi/mgprh与生理盐水对照组比较无统计学意义;龙葵总碱对H22小鼠肿瘤细胞膜Na+,K+-ATPase的影响:高剂量组和中剂量组酶活力分别为1.633umolpi/mgprh和2.064umolpi/mgprh,与生理盐水对照组酶活力4.130umolpi/mgprh比较有非常显著性差异(P＜0.01);而低剂量组酶活力为3.801umolpi/mgprh与生理盐水对照组比较无统计学意义.结果:表明龙葵总碱对S180小鼠和H22小鼠肿瘤细胞膜Na+,K+-ATPase具有明显的抑制作用,并且抑制作用呈量效正相关.②龙葵总碱对S180小鼠肿瘤细胞膜Ca++,Mg++-ATPase的影响:高剂量组酶活力分别为2.964umolpi/mgprh,与生理盐水对照组酶活力3.941umolpi/mgprh比较有非常显著性差异(P＜0.01);中剂量组酶活力为3.290umolpi/mgprh,与生理盐水对照组比较有差异(P＜0.05),而低剂量组酶活力为3.534umolpi/mgprh与生理盐水对照组比较无统计学意义;龙葵总碱对H22小鼠肿瘤细胞膜Ca++,Mg++-ATPase的影响:中剂量组酶活力为1.728umolpi/mgprh,与生理盐水对照组酶活力3.745umolpi/mgprh比较有非常显著性差异(P＜0.01);高剂量组酶活力2.869umolpi/mgprh,与生理盐水对照组比较有差异(P＜0.05),而低剂量组酶活力为3.062umolpi/mgprh与生理盐水对照组比较无统计学意义.结果表明龙葵总碱对S180小鼠和H22小鼠肿瘤细胞膜Ca++,Mg++-ATPase具有明显的抑制作用.结论:龙葵总碱对肿瘤细胞膜Na+,K+-ATPase及Ca++,Mg++-ATPase有显著的抑制作用,这一作用使肿瘤细胞的异常增生受阻,使其细胞代谢的能量不足,从而无法进行"正常"的细胞增殖,进而发挥抑制肿瘤细胞的作用.这可能是其抗肿瘤作用的机理之一.