【摘 要】
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目的：探讨定量PCR和Western blot结合检测对Lewis肺癌C57小鼠瘤细胞表皮生长因子受体(EGFR)、NF-κB表达影响,观察该方对调节癌细胞信号转导的作用机制.方法：小鼠自接种瘤株细胞24h后称重、编号,随机分为8组,每组5只,分别为：①回药爱康方高剂量组(AKH);②荷瘤模型组(对照组);③回药爱康方中剂量组(AKM);④单纯化疗药组(CTX组);⑤回药爱康方中剂量组加化疗组(A
【机 构】
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宁夏医科大学附属回医中医医院、宁夏医科大学回医药现代化省部共建教育部重点实验室,宁夏银川 750004
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目的：探讨定量PCR和Western blot结合检测对Lewis肺癌C57小鼠瘤细胞表皮生长因子受体(EGFR)、NF-κB表达影响,观察该方对调节癌细胞信号转导的作用机制.
方法：小鼠自接种瘤株细胞24h后称重、编号,随机分为8组,每组5只,分别为：①回药爱康方高剂量组(AKH);②荷瘤模型组(对照组);③回药爱康方中剂量组(AKM);④单纯化疗药组(CTX组);⑤回药爱康方中剂量组加化疗组(AKM+CTX);⑥回药爱康方低剂量加化疗药组(AKL+CTX);⑦回药爱康方低剂量组(AKL);⑧回药爱康方高剂量加化疗药组(AKH+CTX).采用RT-PCR和western blot方法检测小鼠组织样本中EGFR、NF-κBmRNA转录水平和蛋白质表达的变化情况.
结果：实时荧光定量PCR结果显示：与模型组小鼠比较,给予回药爱康方,高、中、低剂量干预后,小鼠瘤细胞中EGFR mRNA表达水平显著下调(P＜0.01),而低剂量对NF-κBmRNA的表达水平无统计学差异(P＞0.05),给予回药爱康方,高+CTX、中+CTX、低+CTX、CTX后,小鼠瘤细胞中EGFR表达水平显著下调(P＜0.01),小鼠瘤细胞中NF-κBmRNA表达水平显著上调(P＜0.01);与模型组比较,给予回药爱康方高、中、低剂量干预后,Lewis肺癌C57小鼠EGFR、NF-κB蛋白表达水平无统计学差异性(P＞0.05),给予回药爱康方高+CTX、中+CTX、低+CTX、CTX干预后,Lewis肺癌C57小鼠EGFR蛋白表达水平显著下调、NF-κB蛋白表达水平显著上调(P＜0.01或P＜0.05).
结论：回药爱康方高、中、低与回药爱康方高+CTX、中+CTX、低+CTX、CTX均对EGFRmRNA的表达水平有影响,仅低剂量对NF-κBmRNA的表达水平无影响,同时回药爱康方高、中、低剂量均对EGFR、NF-κB蛋白表达无影响.
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