MGB(Minor Groove Binder)复合探针二重实时定量PCR检测大肠杆菌O157

来源 :中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aigufeixi
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以大肠杆菌O157rfbE和stx2为待检靶基因,设计两对引物和两条MGB探针,rfbE和stx2探针5端分别用FAM和VIC基团标记,3端均用Taqman-MGB标记.建立并优化了检测大肠杆菌O157的二重荧光定量PCR方法,可检测的最低DNA浓度是101拷贝/uL;试验中O157菌株检测结果均为rfbE阳性,而非O157菌株检测结果均为阴性;重复性实验中,批间差异小于80%,批内差异小于70%。实验结果显示此二重荧光定量PCR方法可对分离的可疑大肠杆菌O157菌株进行快速鉴定,同时得知菌株是否携带stx2毒力基因,有利于菌株毒力强弱的判定。
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