【摘 要】
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家蚕杆状病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)是能够自身编码泛素基因的杆状病毒属病毒成员,而泛素-蛋白酶体系统在BmNPV的早期复制过程中扮演了重要角色,所以在BmNPV侵染过程中,病毒及宿主泛素化蛋白的鉴定对于研究泛素-蛋白酶体系统在病毒复制中所起得作用显得尤为重要。本研究借助Red重组系统缺失掉家蚕杆状病毒编码的泛素基因,再通过杆状病毒表达系统构建
【机 构】
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江苏省镇江市京口区学府路301号江苏大学生命科学研究院,江苏镇江,212013
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家蚕杆状病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)是能够自身编码泛素基因的杆状病毒属病毒成员,而泛素-蛋白酶体系统在BmNPV的早期复制过程中扮演了重要角色,所以在BmNPV侵染过程中,病毒及宿主泛素化蛋白的鉴定对于研究泛素-蛋白酶体系统在病毒复制中所起得作用显得尤为重要。本研究借助Red重组系统缺失掉家蚕杆状病毒编码的泛素基因,再通过杆状病毒表达系统构建出融合表达泛素-myc-his蛋白的重组病毒,通过镍住纯化获得泛素化蛋白,最终利用LC-MS/MS技术对这些蛋白进行鉴定。结果 表明家蚕杆状病毒在侵染过程中,其本身一些衣壳蛋白以及和复制相关的DNA聚合酶、解旋酶等都被自身泛素给泛素化。而宿主糖代谢中的一些关键酶及自噬途径中的相关蛋白也都能被病毒泛素化。
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