目的：了解儿科产质粒介导AmpCβ内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌耐药性及分子流行病学情况。 方法：收集128株(包括97株肺炎克雷伯菌和31株大肠埃希菌)AmpC酶表型鉴定试验阳性的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌，采用多重及全长聚合酶链反应(PCR)进行扩增，全长扩增产物测序后，进行序列分析和网上比对，确定其基因型。基因阳性的菌株再用琼脂稀释法检测其耐药性；采用质粒转移接合试验，确定耐药基因是否在种内或种间进行传递。 结果：97株质粒介导的AmpC酶肺炎克雷伯菌扩增出64株(66.0％)为DHA.1基因型，有10株大肠埃希菌中扩增出质粒介导的Ampc酶基因，各有5株携带DHA-1和CMY-2型基因，其中，1株大肠埃希菌中出现新的CMY-2型质粒介导的AmpC酶(Genbank注册号：EU162133)。74株质粒接合试验菌中，20株接合成功，成功率为27.0％。药物敏感性检测发现：对第3代头孢菌素的耐药率均在95％以上，但对亚胺培南的敏感率尚达100％，对单环类的氨曲南、氟喹诺酮类、及氨基糖苷类阿米卡星均有不同程度的耐药。 结论：五家儿童医院临床分离株中存在质粒介导的AmpC酶，流行的基因型以DHA-1型为主，也有少见的CMY-2型;质粒AmpC酶具有广泛的耐药谱、呈现多重耐药，而且耐药性具有可传递性.所以，临床微生物室的及时检测AmpC酶在临床诊断治疗中显得尤为重要。此外，碳青霉烯类药物可作为治疗产质粒介导的AmpC酶细菌感染的有效药物。