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目的:建立用毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)定量测定复杂成分样品中谷氨酰胺(glutamine,Gln)和谷氨酸(glutamate,Glu)的方法。
方法:用芴甲基氯甲酸酯(Fmoc-Cl)作衍生剂,0.2 M硼酸缓冲液为衍生缓冲液,以扁桃酸为内标,对谷氨酸和谷氨酰胺进行毛细管电泳检测。
结果:最佳衍生条件为40μL样品、80μL硼酸缓冲液(0.2 M,pH 8.6)、120 μLFmoc-Cl(0.01M),30 μL扁桃酸(5 g/L)做内标和160μL乙腈在26℃的条件下反应20min血后检测。Gln和Glu标准曲线的r2分别为0.9905和0.9942,回收率最高分别为99.13%和102.1%,保留时间RSD分别为0.63%和1.51%,峰面积RSD分别为0.50%和2.75%。
结论:建立了一种新的用于快速定量检测复杂样品中Gln和Glu方法,能够很好的排除蛋白质等杂质干扰。