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目的:自美国发明专利(美国专利号4863898)证实氨基酸螫合物是以鳌合整体被人体吸收并经血液运输至靶向组织而被利用以来[2],对氨基酸螯合物的研究日益引起人们的广泛关注.南开大学生产的螯合甘氨酸钙已取得国家抗骨质疏松保健品专利(专利号CN 1436770),并在临床应用多年具有抗骨质疏松作用,为进一步验证,我们以骨密度、骨代谢、显微CT三维重组和骨组织形态计量等指标,观察去势大鼠骨质疏松模型服用螯合甘氨酸钙,探讨其抗骨质疏松作用与机制.方法:用60只SD雌性大鼠,分成假手术组、切除卵巢去势组和去势后服用阿伦膦酸钠组、及高中低三个剂量的螯合甘氨酸钙组,每组10只.在服药100天后处死,进行动物尿Ⅰ型胶原C端肽(CTX-1)测定及全股骨骨密度测量和股骨下端不脱钙切片的骨计量学观察与显微CT三维重建,采用美国GE公司eXplore Locus SP型u CT,依扫描协议largetube_ 14um_ 150min_ss进行.图像测试与分析软件:Micview V2.1.2三维重建处理软件;ABA专用骨骼分析平台;目标分割值:1200,选取股骨下端骨骺板下2mm3兴趣窗重建图像、并进行三维重建结构计量学测量.测量所得所有数据均以x±s表示,使用SPSS 11.0统计软件进行LSD-t检验分析,组间比较采用方差分析,两两比较用q检验.结果:①骨密度结果:大鼠手术去势100天后,去势组出现明显的骨质疏松,在骨密度上表现十分显著.BMD在假手术对照组与去势对照组间差异显著.各实验组与去势对照组之间比较,除高剂量组外,其余各组的骨矿物含量间也均有显著性差异,BMD值均有不同程度的增加,以低剂量组增加值最大(假手术132.8±5.59去势117.4±4.39,低剂量130.4±3.85,p<0.001).②骨代谢指标:大鼠手术去势100天后,尿中Ⅰ型胶原C端肽(CTX-1)测定在假手术组与去势组;去势组与各实验组间均有统计学意义.③骨计量学指标分析显示,去势后骨体积密度显著性下降,由假手术组的53.003.20%降至19.162.97%(p<0.001);经服用螯合甘氨酸钙后得到显著性改善(升至44.022.34%与去势组比较p<0.001).同时发现在假手术组与去势组和去势组与螯合甘氨酸钙、二膦酸盐组之间,骨计量学的骨的四环素标记率,类骨质的表面密度、平均类骨质表面厚度及动态指标观察中的骨矿化沉积率与骨矿化延迟时间等指标均有显著性差异.提示去势后骨重建出现明显加快、骨形成与吸收率增加;同时显示螯合甘氨酸钙主要作用为增加骨形成表面、延长骨形成时间,增加类骨质厚度;与假手术比较,类骨质表面由14.181.79%增加至26.105.09%(p<0.001);骨矿化沉积率也由1.580.19 u m/d升至2.050.14 u m/d(p<0.001);而骨矿化延迟时间由2.470.30 d延长至3.760.40d(p<0.001).④在三维重建显微CT观察中,同样发现骨小梁体积比(BV/TV)与骨表面积体积比(BS/BV)显示结果与骨计量学骨体积统计分析结果相似,只是数值均同比例有所减少.另外在三维结构计量上,除骨小梁厚度(Tb.Th)外,骨小梁数目(Tb.N)、骨小梁间隙(Tb.Sp)等均出现显著性变化.结论:服用螯合甘氨酸钙各组与去势对照组比较除高剂量外,其余各组的骨密度与去势对照组间存在显著性差异,证实大鼠股骨下端骺板下的骨量得到显著改善,这与显微CT与大体组织图像观察和骨组织形态计量学观察结果一致.适宜剂量螯合甘氨酸钙,对成去势后骨重建活动的加速及骨转换率的加快,没有不利影响;虽然在骨形成增加的同时骨吸收也有相应增加但同时矿化延迟时间有明显的延长使骨再建周期延长,使得骨重建时间得以加强.总之在螫合甘氨酸钙口服40 mgKg-1·d-1(螯合甘氨酸钙净含量约10mgKg-1·d-1)时,具有刺激成骨细胞增殖的能力,适量的螯合甘氨酸钙能有效防治大鼠实验模型出现骨质疏松作用.