【摘 要】
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鱼类是重要的致敏食物之一.目前关于鱼类过敏原的研究主要集中在硬骨鱼类,而对于软骨鱼过敏原的研究还未见报道.已有研究表明,鱼类中的主要过敏原是分子量约为12 kDa的小清蛋白.因此,本研究拟对海水软骨鱼赤魟的小清蛋白进行分离纯化及性质分析.通过硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose阴离子交换层析及Sephacryl S-200凝胶过滤等技术从赤魟肌肉中分离纯化到2种小清蛋白(命名为PV-Ⅰ和PV-
【机 构】
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集美大学生物工程学院,福建厦门361021;上海海洋大学食品学院,上海201306 集美大学生物工
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鱼类是重要的致敏食物之一.目前关于鱼类过敏原的研究主要集中在硬骨鱼类,而对于软骨鱼过敏原的研究还未见报道.已有研究表明,鱼类中的主要过敏原是分子量约为12 kDa的小清蛋白.因此,本研究拟对海水软骨鱼赤魟的小清蛋白进行分离纯化及性质分析.通过硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose阴离子交换层析及Sephacryl S-200凝胶过滤等技术从赤魟肌肉中分离纯化到2种小清蛋白(命名为PV-Ⅰ和PV-Ⅱ).Tricine-SDS-PAGE的结果显示,PV-Ⅰ和PV-Ⅱ的电泳图谱均为单一条带,表明都得到了高度纯化.MALDI-TOF质谱分析PV-Ⅰ和PV-Ⅱ的分子量分别为12.29和11.95kDa.以小鼠抗蛙小清蛋白单克隆抗体(PARV-19)进行Western blot分析证实,所得的纯化蛋白是小清蛋白.双向电泳分析显示,PV-Ⅰ的等电点为5.4,PV-Ⅱ的等电点为5.0.热稳定性和pH稳定性分析表明,PV-Ⅰ加热易形成二聚体,且随加热时间的延长而增加,而PV-Ⅱ则比较稳定；两种类型的小清蛋白pH稳定性都很好.以过敏患者血清进行dot-blot分析表明,赤魟肌肉中2种类型的小清蛋白均具有IgE反应性.本课题为鱼类过敏研究提供了重要的理论参考.
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