TH转基因修饰细胞脑内移植治疗猴帕金森病的实验研究

来源 :2001年老年性痴呆和帕金森国际学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tonzhofpcb
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目的:将装载人类TH基因的重组质粒,转染至人神经母细胞瘤细胞,构建出表达人类TH基因的工程细胞系,经包囊化处理后植入PD猴模型脑内,使之高效,稳定的表达,弥补变性的黑质细胞中TH含量的不足,使纹状体内DA含量升高而达到治疗作用.方法:将pcDNA<,3>/hTH质粒在大肠杆菌内克隆,转染入神经母细胞瘤细胞系sY5Y细胞,然后用G418筛选出阳性克隆予以细胞培养,将微包囊技术处理后的含有TH基因的修饰细胞植入PD猴模型脑内,观察其行为、CSF中DA含量的变化,用免疫组化法检查移植细胞的存活情况.
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目的:探讨低浓度bFGFT和酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)基因转染对干细胞(Neural stem cells,NSCs)分化的影响.方法:从胚胎16bWistar大鼠前脑室管膜下周围区分离、鉴定、增殖NSCs;将TH基因与缺陷性逆转录病毒载体N2A构建成表达质粒后,用电穿孔方法将TH-N2A转入PA317包装细胞内,收集PA317包装产生的逆转录病毒颗粒,感染休外
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