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【目的】化妆品化学防晒剂中常含具有光化学活性的紫外线吸收剂,可能潜在光毒性。以ECVAM的指导流程为基础,增加UVB对角质细胞潜在光毒作用实验方法探讨,并研究对氨基苯甲酸类、水杨酸类、肉桂酸类、樟脑类、邻氨基苯甲酸甲酯类、二苯甲酮类、苯甲酰甲烷类的潜在的光毒性作用。【材料和方法】以ECVAM的指导流程改进并建立UVB光毒作用方法:用DMEM培养基培养HACAT角质细胞至对数生长期;取2块24孔细胞培养板接种HACAT细胞,过夜孵育;选择了5种ECVAM标准品,包括3种阳性物质（盐酸异丙嗪、盐酸氯丙嗪、诺氟沙星）和2种阴性物质（十二烷基硫酸钠SDS和L-组氨酸）;将标准品成8个质量浓,加入96孔板与3T3细胞共同孵育1h,以培养液为空白对照;随机选择1块培养板作为阳性对照板曝露于UVB下照射,另一块放于黑暗环境中作为阴性对照板（未照射组）。光辐射后将溶液轻轻倒出加入培养基过夜孵育;在每个孔中加入500μL中性红培养基孵育3h,洗净该培养基并加入中性红解附液在室温下震荡10 min,中性红培养基转入96孔板,在540nm波长下检测吸光度,以测试细胞对中性红吸收情况,建立适用于UVB的光毒性实验方法。用上诉改进以后的方法,同事结合ECVAM流程进行Ba1B/c3T3细胞UVA(总能量为5J·cm-2)实验,对氨基苯甲酸类、水杨酸类、肉桂酸类、樟脑类、邻氨基苯甲酸甲酯类、二苯甲酮类、苯甲酰甲烷类共七类化妆品化学防晒剂（每一类选择1-3种受试物,共计20种）进行检测和评价。【结果】5种标准品（苯基苯丙咪唑磺酸、盐酸异丙嗪、诺氟沙星、SDS和L-组氨酸）检测结果通过Phototox 2.0软件分析,比较+UVA和-UVA/+UVB和-UVB条件下获得细胞毒性的结果,以建立标准方法。七类化学防晒剂中的18种防晒剂在UVA和UVB的PIF<2且MPE<0.1,预测这18种防晒剂无潜在光毒性。二苯甲酮的二苯酮-1（Benzophenone-1）在标准ECVAM和改进ECVAM中,均显示PIF>5且MPE>0.15,表明二苯酮-1具有潜在光毒性。对氨基苯甲酸类的戊烷基二甲对胺基苯甲酸（2-Ethylhexyl dimethyl PABA）以标准ECVAM的指导流程进行,PIF<2且MPE<0.1,预测为无潜在光毒性,而在改进ECVAM中,2<PIF<5且MPE>0.15,预测戊烷基二甲对胺基苯甲酸有潜在光毒作用。【结论】改进ECVAM实验后,可预测紫外线UVB吸收剂的光毒性作用,结果提示有2种化学防晒剂可能具有光毒性,在改进ECVAM的指导流程并建立UVB光毒作用方法后,增大了光毒性实验的应用范围,有利于化妆品安全性评价工作的开展。