【摘 要】
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小麦是世界约35％人口的主粮，小麦蛋白是人类重要的植物蛋白质来源，约占谷物蛋白质的38.4%。小麦之所以在世界各地成功种植和发展，最重要的原因是小麦面粉具有独一无二的加工特性，那就是小麦面粉加水和面形成面团后可产生有弹性的网状结构，适于制作成多种食品，如面包、面条、饼干、糕点、馒头等，小麦的这种特殊的和面加工特性主要是由种子贮藏蛋白的结构和特性决定的。本研究首先利用SDS-PAGE和MALDI-T
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小麦是世界约35％人口的主粮，小麦蛋白是人类重要的植物蛋白质来源，约占谷物蛋白质的38.4%。小麦之所以在世界各地成功种植和发展，最重要的原因是小麦面粉具有独一无二的加工特性，那就是小麦面粉加水和面形成面团后可产生有弹性的网状结构，适于制作成多种食品，如面包、面条、饼干、糕点、馒头等，小麦的这种特殊的和面加工特性主要是由种子贮藏蛋白的结构和特性决定的。本研究首先利用SDS-PAGE和MALDI-TOF-MS方法对粗山羊草（Ae.tauschii）HMW谷蛋白1Dx3t和1Dx4t亚基进行分离和鉴定，然后通过AS-PCR扩增、克隆1Dx3t和1Dx4t亚基的全长编码基因。1Dx3t和1Dx4t亚基基因由2535和2508个碱基组成，分别编码845和836个氨基酸，推测的分子量分别为87655.26 Da和86664.24 Da，这和MALDI-TOF-MS所得到的结果几乎一致。在1Dx3t和1Dx4t亚基中还发现了18个新的SNP位点。1Dx5亚基是公认的优质亚基，而1Dx3t亚基从序列上看与之非常相似，仅比1Dx5亚基在146-151的位置上多了6个氨基酸，而1Dx3t亚基又仅比1Dx4t亚基多了9个氨基酸的插入。我们还成功的对1Dx3t和1Dx4t亚基进行了原核表达，证明了所克隆基因的正确性。通过同源进化树的比较发现，1Dx3t亚基与1Dx5亚基的同源关系最近。此外，对这两个亚基二级结构预测发现，1Dx3t亚基的β折叠的含量在所有的1Dx亚基中是最高的。因此，我们推测1Dx3t亚基极有可能是一个对面筋品质具有重要作用的候选优质新亚基，有可能在小麦品质改良中发挥重要作用。
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