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目的:建立具有完全自主知识产权的胃蛋白酶原Ⅰ纳米磁珠时间分辨荧光免疫(Nano-TRFIA)快速定量检测方法.方法:以纳米磁性微球(Nano)为固相载体结合时间分辨荧光免疫分析技术,用DTTA-Eu3+直接法制备EU3+-PGI单克隆抗体(001＃),并用PGI单克隆抗体(012＃)包被纳米磁性微球,避免了传统板式TRFIA必须的包被板条的工艺.由于抗体包被在微球的表面,反应的比表面积大大增加,并且整个抗原抗体的结合过程在全液相中进行,提高了反应效率,有效缩短反应时间.检测时,待测样品中的PGI抗原、包被有PGI单克隆抗体(012＃)的纳米磁珠、以及EU3+-PGI单克隆抗体(001＃)三者形成抗体-抗原-抗体的夹心复合物,利用纳米磁珠的超顺磁性实现快速分离,EU3+与增强剂中的另一种整合剂螯合形成一种胶态分子团,分子团在紫外光的激发下荧光信号增强了百万倍.较传统的TRFIA荧光更强、更稳定,反应时间更短.对180名我院自愿体检者和住院病人以Nano-TRFIA法进行血清学PGI检测.