【摘 要】
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目的:CRRT采用枸橼酸抗凝时会升高血液枸橼酸浓度,是否会对免疫细胞功能产生影响还不清楚.本研究通过体外培养方式观察不同枸橼酸浓度培养基对单核细胞分泌功能的影响.方法:采用THP-1细胞株体外培养.在正常的培养条件下加入枸橼酸钠使之浓度到达0,0.5mmol/L、1.0mmol/L及2.5mmol/L.将细胞培养到预定时间后,细胞在内毒素(LPS)刺激下,用CCK-8试剂盒测定细胞活性和分泌细胞因
【出 处】
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第九届中国血液净化论坛暨2017年中国医院协会血液净化中心管理分会年会
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目的:CRRT采用枸橼酸抗凝时会升高血液枸橼酸浓度,是否会对免疫细胞功能产生影响还不清楚.本研究通过体外培养方式观察不同枸橼酸浓度培养基对单核细胞分泌功能的影响.
方法:采用THP-1细胞株体外培养.在正常的培养条件下加入枸橼酸钠使之浓度到达0,0.5mmol/L、1.0mmol/L及2.5mmol/L.将细胞培养到预定时间后,细胞在内毒素(LPS)刺激下,用CCK-8试剂盒测定细胞活性和分泌细胞因子白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平.使用正常培养条件下的单核细胞做对照.
结果:不同构椽酸浓度对培养单核细胞活性无明显影响。在LPS浓度为0.05ug/ml,0.1ug/ml时,单核细胞TNF-α的表达量都偏低而且不同构盐酸浓度组之间表达没有明显差异;在LPS浓度为1ug/ml时,TNF-α的表达量升高,其中,培养液中构盐酸钠浓度为0.5mmol/L和1mmol/L时,在时间点6h,12h TNF-α的表达量都与对照组有明显差异(P<0.05),都出现先降低后增加;而在构盐酸钠浓度为2.5mmol/L时,TNF-α的表达量随着时间的增加表达量降低,与对照组相比除了24h外,其他三个时间点表达量都明显降低(P<0.05)。当LPS浓度为0.05ug/ml,0.1ug/ml,1ug/ml时,IL-6的表达量是随着培养时间的增加而增加的;在培养液中构盐酸钠浓度为1mmol/L时,IL-6的表达量与对照组相比都有明显降低(P<0.05),而且随着时间增加呈现一个升高的趋势;而当培养液中构盐酸钠浓度为0.5mmol/L时,与对照组相比时IL-6的表达量首先呈现一个明显降低的趋势(P<0.05),在24小时和48小时,表达量又出现相对升高的趋势。
结论:不同浓度构橡酸钠对单核细胞活性无明显影响,但可能影响其受外来刺激活化时的功能,即细胞因子分泌。这一点对于临床CRRT治疗构橡酸抗凝的意义还有待进一步研究。
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