人促卵泡生成素基因序列的优化合成及在CHO细胞内的稳定表达

来源 :华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Jingle2008
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  本研究依据人FSH的a亚基和p亚基的蛋白序列,优化设计出易于在真核细胞内高表达的基因序列,化学合成改构的a亚基和p亚基因序列,克隆到质粒载体内,序列分析确认合成的基因序列完全正确。对细胞培养上清进行Western Blot分析,结果显示,表达的FSH能与鼠抗人FSH单抗产生反应,出现一条特异的显色带,无其他显色带。将获得的表达细胞株,初步放大到250ml的细胞培养瓶,细胞长满瓶底后换无血清培养基,收集培养上清,ELISA检测试剂盒测定FSH的含量,表达量约为30-40IU/mL。表达细胞株正逐步加压筛选,进一步提高表达水平。
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