【摘 要】
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目的:建立安全有效的B超引导下的猕猴活体穿刺以获取新鲜肝脏、肾脏样品的方法.
方法:4只猕猴,雄性,8-12kg,10-12岁,动物经氯胺酮肌肉注射进行麻醉,麻醉后将其保定于手术台
【机 构】
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中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所,昆明650118云南省中医学院,昆明650200
【出 处】
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2017年第十五届中国北方实验动物科技年会
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目的:建立安全有效的B超引导下的猕猴活体穿刺以获取新鲜肝脏、肾脏样品的方法.
方法:4只猕猴,雄性,8-12kg,10-12岁,动物经氯胺酮肌肉注射进行麻醉,麻醉后将其保定于手术台,侧仰卧位,于腹肋间区域、侧腰部肋缘下腹部区域剃毛及常规碘伏消毒.安装B超引导架于3.5Hz意大利百胜彩色电脑声像仪探头上,于猕猴右上腹肋间区域、侧腰部肋缘下腹部区域进行探查寻找所要穿刺的肝脏或肾脏器官,进一步调节探头位置以便确认目标,注意避让门静脉及下腔静脉等大血管,将活检枪的射程调为15mm,将穿刺针在穿刺引导架的引导下垂直经皮肤插入腹部约1cm,观察B超实时影像,使穿刺目标与穿刺针位置在引导线内,即穿刺目标与穿刺针为垂直部位,按动穿刺针扳机按钮进行穿刺,穿刺后迅速拔出穿刺针.将所获得的肝、肾组织进行RNA提取.
结果:每只动物每次穿刺均获取的肝或肾组织样品量经换算约13mg,提取的RNA纯度高、完整性好,本法操作快速、可靠,安全,所有实验猴术后恢复良好,无大出血及死亡.
结论:采用活体取材的方式获得新鲜肝、肾脏组织以提取RNA及蛋白样品,可以实时获得药物代谢不同阶段的组织样品来进行相关分析及检验,降低了实验成本,大大提高了实验猕猴的利用率,符合实验动物福利制度.
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