建立B超引导的获取新鲜组织样品的非人灵长类动物猕猴肝脏及肾脏活体穿刺的方法

来源 :2017年第十五届中国北方实验动物科技年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:w313296304
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目的:建立安全有效的B超引导下的猕猴活体穿刺以获取新鲜肝脏、肾脏样品的方法. 方法:4只猕猴,雄性,8-12kg,10-12岁,动物经氯胺酮肌肉注射进行麻醉,麻醉后将其保定于手术台,侧仰卧位,于腹肋间区域、侧腰部肋缘下腹部区域剃毛及常规碘伏消毒.安装B超引导架于3.5Hz意大利百胜彩色电脑声像仪探头上,于猕猴右上腹肋间区域、侧腰部肋缘下腹部区域进行探查寻找所要穿刺的肝脏或肾脏器官,进一步调节探头位置以便确认目标,注意避让门静脉及下腔静脉等大血管,将活检枪的射程调为15mm,将穿刺针在穿刺引导架的引导下垂直经皮肤插入腹部约1cm,观察B超实时影像,使穿刺目标与穿刺针位置在引导线内,即穿刺目标与穿刺针为垂直部位,按动穿刺针扳机按钮进行穿刺,穿刺后迅速拔出穿刺针.将所获得的肝、肾组织进行RNA提取. 结果:每只动物每次穿刺均获取的肝或肾组织样品量经换算约13mg,提取的RNA纯度高、完整性好,本法操作快速、可靠,安全,所有实验猴术后恢复良好,无大出血及死亡. 结论:采用活体取材的方式获得新鲜肝、肾脏组织以提取RNA及蛋白样品,可以实时获得药物代谢不同阶段的组织样品来进行相关分析及检验,降低了实验成本,大大提高了实验猕猴的利用率,符合实验动物福利制度.
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