【摘 要】
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目的 肝星状细胞的活化在肝纤维化的进程中扮演关键角色.白介素-10是重要的抗肝纤维化因子,但其半衰期短,作用广泛,基因治疗可能是其发展方向.本研究以肝细胞作为IL-10基
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目的 肝星状细胞的活化在肝纤维化的进程中扮演关键角色.白介素-10是重要的抗肝纤维化因子,但其半衰期短,作用广泛,基因治疗可能是其发展方向.本研究以肝细胞作为IL-10基因的表达细胞,观察其对体外原代培养的肝星状细胞的作用,探讨IL-10基因治疗肝纤维化的可行性和途径.方法 通过去唾液酸糖蛋白受体介导的脂质体将重组质粒pcDNA3.0-rIL-10转染大鼠肝细胞系BRL,采用RT-PCR及ELISA方法观察IL-10 mRNA和分泌型IL-10蛋白的表达情况,用MTT法及流式细胞分析法检测转染空质粒和重组质粒的BRL细胞的增殖、凋亡情况.分别将正常的、转染pcDNA3.0空质粒及转染pcDNA3.0-rIL-10质粒的BRL细胞与原代HSC共培养,通过相差显微镜下观察、MTT、原位末端标记检测(TUNEL)、western blot等方法观察各组HSC的表型变化、增殖、凋亡、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型前胶原的表达.结果 转染后的BRL细胞获得高水平的IL-10表达,而后者抑制了BRL细胞的凋亡.BRL细胞显著促进HSC的增殖、凋亡以及α-S姒和Ⅰ型前胶原的表达.表达IL-10基因后,BRL细胞对HSC的增殖、α-SMA和Ⅰ型前胶原表达的促进作用被抑制,进一步促进HSC的凋亡.结论 以肝细胞为基因表达细胞,有望成为IL-10基因治疗肝纤维化的有效途径.
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