一个玉米纹枯病菌诱导表达启动子的鉴定和分析

来源 :中国植物病理学会第十一届青年学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wusyun
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  玉米纹枯病是由立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kühn)引起的真菌性病害,是我国玉米产区的主要病害之一。玉米抗病基因的克隆以及启动子的分离可以使我们更好地了解寄主与病原菌的互作并为基因工程改良奠定基础。本研究对玉米感病自交系B73接种玉米纹枯病菌YWK196和YWK62,采用转录组测序技术(RNA-seq)进行基因表达差异分析,筛选得到候选基因,其中基因GRMZM2G084947即为筛选到的候选基因之一。该基因(GRMZM2G084947)通过测序和荧光定量分析结果显示接种玉米纹枯病菌YWK-196和YWK62后上调表达。克隆该基因的启动子构建表达载体,转入水稻发现该启动子能够被玉米纹枯病菌YWK-196激活。通过启动子预测软件(Place)分析,对启动子进行截短,构建连有GUS报告基因的表达载体。利用烟草瞬时表达系统用玉米纹枯病菌YWK-196离体接种烟草,提取烟草组织蛋白,利用酶标仪检测接种后报告基因的表达,验证确定了-1144bp至-1084bp和-1084bp至-973bp这两个区段为受病原菌诱导的关键区域。上述的病原诱导关键区域的鉴定,可以用于与其他抗病基因结合来改良植物抗病性。
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