【摘 要】
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目的：体外分离、培养和纯化大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstem cells, MSCs),并研究中药单体丹酚酸B对MSCs增殖和分泌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响。方法：用贴壁培养法分离、培养和纯化MSCs,免疫荧光法检测细胞抗原CD44和CD34。用含不同浓度丹酚酸B的低糖DMEM培养液培养MSCs 24h
【机 构】
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广东中医药大学实验动物中心,广州 510405 广东中医药大学基础医学院,广州 510405
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目的：体外分离、培养和纯化大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstem cells, MSCs),并研究中药单体丹酚酸B对MSCs增殖和分泌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响。方法：用贴壁培养法分离、培养和纯化MSCs,免疫荧光法检测细胞抗原CD44和CD34。用含不同浓度丹酚酸B的低糖DMEM培养液培养MSCs 24h后,用MTT法检测细胞增殖水平。RT-PCR法检测培养24h、48h、72h后VEGF mRNA的表达。结果：获得纯化的MSCs,免疫荧光检测细胞表面标记CD44呈阳性,CD34呈阴性。MTT结果显示,0.3μg/mL和3μg/mL丹酚酸B均可促进MSCs的增殖,两者光吸收值与空白对照组比较,P<0.01,p<0.05,而0.03μg/mL和30μg/mL丹酚酸B组细胞的光吸收值与空白对照组比较,p>0.05。随着培养时间的增加,0.03μg/mL,0.3μg/mL,3μg/mL和30μg/mL丹酚酸B可明显促进VEGF mRNA的表达(与空白对照组比较,p<0.05),空白对照组的VEGF mRNA表达无明显变化。结论：用贴壁培养法可获得纯化的MSCs,丹酚酸B可促进MSCs增殖的和VEGFmRNA的表达。
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