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文章介绍了结合频分复用的荧光共焦生物显微成像技术的基本原理和实现方法.该系统通过对多路激发光信号的载频调制,聚焦到生物样品上产生荧光信号,再通过傅立叶变换,滤波和解调制过程,将两路荧光信号还原.频分复用共焦显微成像系统能够实现多通道,实时,快速探测生物细胞荧光信号,能有效提高共焦扫描显微镜的时间和空间分辨率等特点.实验完成了双路荧光共焦显微成像系统的搭建,并成功探测了老鼠神经细胞样品所发出的双路荧光信号.