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目的:建立罗勒ISSR分析的PCR反应体系。
方法:CTAB法提取叶片DNA,通过单因素试验,研究了Taq DNA聚合酶用量、dNTP、引物和Mg2+浓度4种因素对ISSR-PCR扩增的影响,建立了适合于罗勒ISSR-PCR反应体系。
结果:适于罗勒ISSR-PCI反应体系为25ul总体积中内含lxPCR反应缓冲液(Mgfree)、1.5U Taq DNA聚合酶、0.8mmol/LDNPS、1.0vmol/L引物,2.0mmol/LMgCl2。
结论:建立了罗勒ISSR-PCR反应体系,为应用ISSR技术鉴定罗勒种质资源和遗传多样性研究奠定了基础。