槐糖脂诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及其机制研究

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目的:研究槐糖脂对人肝癌HepG2细胞的毒性作用以及可能存在的作用机制。方法:在细胞体外培养技术的基础上,使用槐糖脂以不同刺激时间和剂量来干预人肝癌HepG2细胞,使用MTT test法检测细胞增殖抑制率,使用倒置相差显微镜以及荧光显微镜观察给药后各组的细胞形态学变化,在流式细胞仪上使用Annexin V/PI双染法检测各组细胞的凋亡变化,使用试剂盒检测各组细胞的Caspase 3和Caspase 9的活性表达量。结果:槐糖脂可以在体外抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,并且成浓度和时间的依赖性,且槐糖脂浓度在25ug/mL且作用24h后,细胞抑制率可达50%左右;使用倒置相差显微镜观察到槐糖脂给药组细胞出现增殖率受到抑制,细胞贴壁不牢,折光度降低,胞内出现颗粒样物质等现象;DAPI染色后在荧光显微镜下观察到细胞出现核碎裂、核溶解现象,凋亡小体形成,呈典型的凋亡改变;流式细胞仪结果显示低浓度的槐糖脂能诱导人肝癌HepG2细胞的凋亡,且随着槐糖脂剂量的增大,大部分细胞由凋亡转变为直接死亡;Caspase 3和Caspase 9活性测定试剂盒检测发现阳性对照药组与槐糖脂给药组的Caspase 3和Caspase 9的活性表达量明显高于空白对照组。结论:槐糖脂可以体外抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,其机制可能是通过Caspase 3通路来诱导人肝癌HepG2细胞发生凋亡。
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