目的：通过在大肠杆菌密度感应缺陷株中克隆并表达sahH基因,恢复该菌株的甲基循环通路。以此构建甲基循环完善的密度感应缺陷株,为进一步研究密度感应机制与代谢循环对微生物生理活动的调节奠定基础。方法：通过扩增铜绿假单胞菌的sahH基因,克隆到表达载体pGEX4T-1上,经酶切及基因测序鉴定后,将结果正确的克隆转入大肠杆菌密度感应缺陷株。在IPTG诱导条件下培养,通过考马斯亮蓝染色及蛋白印迹的方法,证明SahH-GST融合蛋白在该菌株中的表达。结果：本实验成功扩增了sahH基因,并完成该基因的克隆。经过诱导后,考马斯亮蓝染色实验中发现,在转入sahH基因克隆的大肠杆菌密度感应缺陷株中表达出约75KD大小的蛋白,其大小与SahH-GST蛋白相符。经过蛋白印迹实验证明,该条带可与特异性的GST抗体结合,进一步证明SahH-GST融合蛋白的表达。结论：大肠杆菌密度感应缺陷株内可以表达外源基因sahH,恢复了甲基循环的该菌株可进一步应用于密度感应与代谢循环调节作用的实验。完成大肠杆菌内的相关机制的初步探索后,可将该结论在口腔主要致病菌之一的变形链球菌中进一步验证,籍此丰富和完善其致病机理。