流式细胞术检测结核分枝杆菌在细胞内药敏方法的探讨

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目的探讨建立利用流式细胞仪检测结核分枝杆菌在肺泡上皮A549细胞内药敏实验的方法。方法利用标记了乙酰乙酸荧光素FDA的结核分枝杆菌感染肺泡上皮A549细胞,构建成侵染模型。用阿米卡星杀死细胞外的结核分枝杆菌。再用左氧氟沙星与感染结核分枝杆菌的细胞孵育,以作用于细胞内的结核分枝杆菌。利用流式细胞仪检测氧氟沙星作用前后细胞内结核分枝杆菌的荧光强度的变化,从而检测出结核分枝杆菌在细胞内的药敏情况。结果感染细胞的20株结核分枝杆菌在左氧氟沙星作用前后荧光强度无明显变化(p>0.05)。结论目前流式细胞仪虽可以快速检测结核分枝杆菌的药敏情况,但是对于细胞内结核分枝杆菌药敏检测由于存在染料残留产生荧光干扰等问题,还未能找到较好的方法检测结核分枝杆菌在细胞内的药敏情况。
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