铜绿假单孢菌大鼠慢性肺部感染模型的建立

来源 :中华医学会首届全国内科感染及合理应用抗生素专题研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lbsylh
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目的:通过锐孔喷射装置,将铜绿假单孢菌藻酸盐包裹体凝胶小珠接种至大鼠肺部,建立铜绿假单孢菌大鼠慢性肺部感染模型.并通过细菌学指标和病理学指标对其进行评价.方法:(1)健康清洁级Sprague-Dawley大鼠300只,随机分为3组:分别为铜绿假单孢菌PAO1感染组,铜绿假单孢菌PAO-JP2感染组,对照组.(2)应用锐孔喷射装置,将两株铜绿假单孢菌的藻酸盐混悬液制成铜绿假单孢菌藻酸盐包裹体凝胶小珠,接种至大鼠肺部,建立两组大鼠慢性肺部感染模型,以无菌生理盐水-藻酸盐包裹体接种组作为空白对照组.在接种前,接种后3,7,14,28天,取每组大鼠肺分别进行肺组织匀浆菌落计数和病理学检查.根据细菌学和病理学指标对建立的肺炎模型进行评价.(3)肺炎模型的评价标准:急性期:①细菌学检查:每克肺组织含菌量为>105CFU;②病理组织学检查:病理学改变包括:肺组织水肿、实变、纤维蛋白渗出、中性粒细胞浸润、出血.慢性期:①细菌学检查:每克肺组织含菌量为>103CFU;②病理组织学检查:病理学改变包括:肺组织实变、纤维增生、淋巴细胞浸润.结果:(1)细菌学指标:感染后3、7、14天,对照组肺组织均未培养出细菌,PAO1组和PAO-JP2组肺组织均分别培养出野生型和变异型铜绿假单孢菌,感染后3天,PAO1组和PAO-JP2组大鼠肺组织匀浆菌落计数均>105CFU/g,感染后7、14天,上述两组大鼠肺组织菌落计数均>103CFU/g.(2)病理学指标显示:接种后3、7天,感染动物肺组织均有不同程度的脓肿、实变、水肿、不张、出血表现,镜下可见中性粒细胞聚集在藻酸盐包被体周围,形成脓肿.接种后14、28天,实变逐渐减少,以局部肺不张、纤维增生、肉芽肿形成为主要表现.而对照组大鼠肺部除接种后第3天局部略有充血、少量炎症细胞外,其余各阶段肺组织均未见异常.结论:细菌学指标和病理学指标的监测表明,使用锐孔喷射装置,将铜绿假单孢菌/藻酸盐混悬液制成铜绿假单孢菌藻酸盐包裹体凝胶小珠,通过气管插管的方法将其接种至大鼠肺部,可以成功地建立大鼠慢性肺部感染模型.
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