稻曲病菌产毒突变体的筛选

来源 :中国植物保护学会第十一次全国会员代表大会暨2013年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mylovesm
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  稻曲病是由稻曲病菌[Ustilaginoidea virens (Cooke) Tak.]引起的水稻穗部真菌病害,近年来已成为中国乃至世界范围内的水稻主要病害之一.稻曲病菌次生代谢产生的稻曲毒素(Ustiloxins)是一类具有阻断真核细胞有丝分裂活性的环肽毒素,有较强的细胞毒性,对人畜和植物有毒害作用,已成为稻米食用安全的突出问题.目前至少已经分离、鉴定了5种稻曲毒素,其中稻曲毒素A(UstiloxinA)是主要的成分,占毒素总含量的80%左右.实验室利用双元载体pBHt2和农杆菌SK1044成功构建了稻曲病菌农杆菌介导的T-DNA高效遗传转化体系,构建获得了12 000余个突变菌株,并完成突变体库评价和田间致病力检测.本研究以2012年接种稻曲病菌突变体致病获得的402份稻曲球样品为实验材料,采用高效液相色谱(HPLC)检测稻曲球中的毒素A含量,筛选出产毒能力突变的突变菌株,并检测了突变菌株的生物学性状以及与信号物质H2O2对其生长速率及产孢能力的影响.研究结果表明,与野生型菌株P-1致病产生稻曲球的毒素A含量相比,402份稻曲球样品中有316份稻曲球样品的毒素A含量差异不显著,57份稻曲球样品毒素A含量显著升高,29份稻曲球样品毒素A含量显著降低.其中,10株突变菌株的毒素A产量比野生型菌株P-1提高80%及以上,分别是突变菌株1090、1108、1149、1302、1304、1376、1442、1466、1603、1641;4株突变体毒素A产量比野生型菌株P-1降低40%及以上,分别是突变菌株1025、1047、1410、1623.检测这14株突变菌株的生物学性状,发现与野生型菌株P-1相比,突变菌株1025、1047生长速率降低,其余突变菌株生长速率增加;突变菌株1090、1149、1302产孢量减小,其余突变菌株产孢量增大.H2O2对突变体生物学形状的影响:突变菌株1090的生长速率在低浓度H2O2作用下显著增加,其余突变体的生长速率和产孢量都受到各浓度H2O2的抑制,其中,突变菌株1603、1641的产孢能力对H2O2最为敏感.根据本次实验结果,筛选获得产毒能力、生长速率及产孢量显著变化、对H2O2敏感的突变体1025、1090、1410、1603、1623、1641进入后续研究.
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