【摘 要】
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α-L-鼠李糖苷酶(α-L-rhamnosidase[E.C.3.2.1.40])是一种能特异性水解许多物质末端的α-L-鼠李糖基的糖苷水解酶,天然的α-L-鼠李糖苷酶热稳定性差,制约了其在柑橘类果汁脱
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α-L-鼠李糖苷酶(α-L-rhamnosidase[E.C.3.2.1.40])是一种能特异性水解许多物质末端的α-L-鼠李糖基的糖苷水解酶,天然的α-L-鼠李糖苷酶热稳定性差,制约了其在柑橘类果汁脱苦工艺中的应用。为了提高黑曲霉(Aspergillus niger)JMU-TS528的α-L-鼠李糖苷酶的热稳定性,通过PoPMuSiC算法在计算机中计算单点突变体折叠自由能(△△G)的变化,确定了4个突变位点(K573W,E631Y,K406R,K573R),将突变点在巴斯德毕赤酵母中表达。结果表明:K573W和E631Y的热稳定性没有发生改变,K406R和K573R在60℃的半衰期分别增加了120,18 min。双点突变体K406R-K573R表现出协同效应,60℃时半衰期增加了180 min。这一结果将有利于进一步研究α-L-鼠李糖苷酶的热稳定性。
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