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家蚕微孢子虫(Nosemabombycis)是一种专性细胞内寄生的真菌,其寄主主要是经济昆虫家蚕,能引起家蚕微粒子病从而给我国养蚕业造成巨大的经济损失。营细胞内专性寄生的病原微生物为了能更好的在宿主细胞内生长和繁殖,会对宿主细胞循环与凋亡过程参与调节。利用石蜡切片及TUNEL技术研究发现家蚕微孢子虫感染家蚕能够明显抑制家蚕中肠细胞凋亡,感染家蚕胚胎细胞(BmE-SWU1)能够抑制放线菌素D(Actinomycin D,ActD)诱导的细胞凋亡。我们在家蚕微孢子虫中发现一大簇丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpin)基因,可能在与宿主互作,调控宿主免疫等方面有重要作用。其中家蚕微孢子虫丝氨酸蛋白酶抑制剂14(NbSPN14)进化分析表明其与痘病毒丝氨酸蛋白酶抑制剂(CrmA)有较近的聚类关系,CrmA已被证明能抑制细胞凋亡,推测NbSPN14可能参与调控家蚕微孢子虫抑制宿主细胞凋亡。本实验室前期已成功构建一株持续表达家蚕微孢子虫丝氨酸蛋白酶抑制剂(NbSPN14)的转基因细胞系。用ActD处理细胞24后,通过流式细胞仪及DNALadder分析发现转NbSPN14基因细胞凋亡率明显低于正常对照组细胞,说明NbSPN14在家蚕微孢子虫抑制宿主细胞凋亡中起到关键作用。