【摘 要】
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禽腺病毒4型(Fowl adenovirus type 4, FADV-4)属于Ⅰ群禽腺病毒，主要感染3-5周龄的肉鸡、种鸡及蛋鸡，主要引起心包积液综合症和包涵体肝炎。根据禽腺病毒4型(Fowl adenovirus4,FADV-4)五邻体(penton)基因序列,设计合成1对特异性引物,建立了FADV-4的纳米PCR检测方法.应用该方法对FADV-4标准毒株及临床疑似病料进行检测,可扩增出498
【机 构】
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天津市畜牧兽医研究所,天津 300381;农业部兽用药物与诊断技术天津科学观测实验站,天津,300381;天津市畜禽健康养殖技术工程中心,天津 300381
【出 处】
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第六届京津冀一体化畜牧兽医科技创新研讨会暨新思想、新方法、新观点论坛
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禽腺病毒4型(Fowl adenovirus type 4, FADV-4)属于Ⅰ群禽腺病毒，主要感染3-5周龄的肉鸡、种鸡及蛋鸡，主要引起心包积液综合症和包涵体肝炎。根据禽腺病毒4型(Fowl adenovirus4,FADV-4)五邻体(penton)基因序列,设计合成1对特异性引物,建立了FADV-4的纳米PCR检测方法.应用该方法对FADV-4标准毒株及临床疑似病料进行检测,可扩增出498bp的特异性核酸片段.特异性试验结果显示,该方法对鸡新城疫病毒、传染性支气管炎病毒等12种家禽常见病原的扩增结果均为阴性,与国内报道的Ⅰ群禽腺病毒1、2、8、10、12等5个主要血清型之间没有交叉反应.敏感性试验结果表明,该方法对FAdV-4的最低核酸检出量为2.7×10-5ng/μL,较常规PCR方法敏感10倍.应用该方法和病毒分离培养法同时对87份临床样品进行检测,纳米PCR方法和病毒分离培养方法均检出阳性样品14份,两者符合率100％.对扩增产物测序结果进行BLAST分析,结果表明14份阳性样品的序列与GenBank中已发表的禽腺病毒4型五邻体基因序列的同源性为97.8％～100％.以上结果表明本研究建立的纳米PCR方法特异性好、敏感性高,具有很好的重复性,可用于禽腺病毒4型的临床诊断和分子流行病学调查.
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