【摘 要】
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目的 通过观察重组全长人釉基质蛋白(recombinant full-length human amelogenin,rhAm)诱导人hBMSCs成骨分化的作用及NF-κB信号通路的相关变化,初步探索hBMSCs在rhAm作用下成骨分化的分子调控机制.方法 体外培养hBMSCs,取10μg/ml的25KDa全长rhAm作用于细胞实验组.采用RT-PCR、及Western blot以及方法检测不同时
【机 构】
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上海交通大学医学院附属第九人民医院牙周科,上海200011
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目的 通过观察重组全长人釉基质蛋白(recombinant full-length human amelogenin,rhAm)诱导人hBMSCs成骨分化的作用及NF-κB信号通路的相关变化,初步探索hBMSCs在rhAm作用下成骨分化的分子调控机制.方法 体外培养hBMSCs,取10μg/ml的25KDa全长rhAm作用于细胞实验组.采用RT-PCR、及Western blot以及方法检测不同时间点rhAm作用hBMSCs后成骨因子(Runx2、ALP、COL-I)和及NF-κB信号通路分子相关因子(P65、P52)的变化;利用商品化NF-κB阻断剂(PDTC)调控细胞信号分子后,检测不同时间点rhAm作用hBMSCs后NF-κB信号通路分子和成骨因子的表达.并应用碱性磷酸酶和茜素红染色法,检测不同实验组中hBMSCs成骨矿化的变化.
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本文综述了口腔颌面部领域常用的间充质干细胞类型,以及近年来基于牙源性间充质干细胞的组织修复和再生进展.间充质干细胞是具有多项分化潜能的成体干细胞,在口腔颌面部领域,间充质干细胞在修复和再生因畸形、创伤、手术损伤、疾病等引起的组织缺损方面有广泛应用前途.牙源性干细胞与其他部位来源的间充质干细胞相比,具有更强的增殖能力,且更利于再生口腔颌面部组织.
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目的 研究低氧对人牙周膜细胞(hPDLCs)增殖、细胞周期动力学的影响.方法 采用组织块法体外分离培养hPDLCs;取第3～5代细胞分别在常氧和低氧(1.5％～2％O2)条件下培养12、24、36、48h后采用MTT法检测低氧对细胞增殖的影响;并通过流式细胞术检测低氧条件下细胞周期的变化.
目的 研究氢气(H2)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)刺激的人牙周膜成纤维细胞(hPDLCs)成骨能力的影响.方法 改良酶消化法培养hPDLCs、鉴定其组织来源并进行多向分化能力的检测.取生长状态良好的细胞分为普通培养组、成骨诱导组、LPS (100 ng/ml)刺激组及H2(3％) +LPS (100 ng/ml)组(该两组均为成骨诱导培养),培养3周后行茜素红染色定量检测钙化物含量,另
目的 检测淫羊藿苷(ICA)对颌骨成骨细胞Wnt通路相关基因β-catenin、cyclinD1、Runx-2及ALP的表达的影响.探讨Wnt信号通路是否参与了ICA促成骨细胞分化增殖这一过程.方法 采用RT-PCR的方法,将颌骨成骨细胞培养液分为4组,分别是对照组:含5ul/ml浓度DMSO的培养液;实验组1:单纯ICA组即含1ug/mlICA的培养液;实验组2:单纯Wnt通路抑制剂组即含0.1
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目的 牙龈是牙周组织的重要组成部分,其数量多、易于获取,且其中含有牙龈间充质干细胞(GMSCs).本实验的目的是建立GMSCs膜片与根端牙胚条件培养液的直接共培养体系,在体内和体外检测其分化和成类牙周膜结构的情况.同时,以牙周膜干细胞(PDLSCs)作为阳性对照组进行对比.旨在为牙周组织工程寻找新的种子细胞.
目的 骨髓源性的细胞(BMDCs)是否作为前体细胞参与牙周修复/再生.方法 首先,将GFP+/+转基因小鼠的BMDCs移植入辐照后C57BL/6小鼠体内,建立嵌合体小鼠模型.其后,在嵌合体小鼠上颌第一磨牙的近中根方制备三壁的牙周缺损并填入煅烧牛骨粉.最后,将嵌合体小鼠随机分成六组,分别在缺损制备后3、7、14、21、28和60天时取材.GFP+的BMDCs参与牙周修复/再生的情况通过活体成像系统和
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目的 牙周病发病率很高,是成人牙齿缺失的主要原因.实现牙周组织的结构和功能再生是一个巨大的挑战.组织工程技术的出现为实现牙周组织的完全再生提供了全新的思路和方法,而脐带间充质干细胞(UCMSCs)的发现又为牙周组织工程提供了更为理想的种子细胞.UCMSCs具有组织来源丰富、细胞原始、增殖能力强和安全无病毒感染风险等优点,并且成功避开了胚胎干细胞来源缺乏、异体排斥、道德伦理等诸多限制,成为干细胞领域