【摘 要】
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根据GenBank登录的牡丹ACS基因DNA全长序列(FJ769773),设计一对特异性引物,在优化的PCR扩增体系的基础上,用高保真DNA聚合酶KOD-Plus从‘洛阳红’牡丹叶片总DNA中扩增出牡丹A
【机 构】
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河南科技大学林学院,洛阳471003
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根据GenBank登录的牡丹ACS基因DNA全长序列(FJ769773),设计一对特异性引物,在优化的PCR扩增体系的基础上,用高保真DNA聚合酶KOD-Plus从‘洛阳红’牡丹叶片总DNA中扩增出牡丹ACC合成酶基因片段PsACS-4,测序结果表明克隆序列长970 bp,不包含牡丹ACS基因内含子序列,与目标序列同源性达100％;用SacⅠ和smaⅠ对重组质粒和空载体pBI121双酶切、连接,将PsACS-4基因片段定向克隆到植物表达载体pBI121的35S启动子下游,成功构建了牡丹ACS反义基因植物表达载体.
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