【摘 要】
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目的 研究αB-晶体蛋白基因R11H突变导致先天性白内障的分子机制。方法 利用基因重组技术将野生型及R11H突变型人αB-晶状体蛋白基因(CRYAB)克隆到原核表达载体pET 28a(+
【机 构】
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430071,武汉大学中南医院基因诊断中心
【出 处】
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第八次全国医学遗传学学术会议(中华医学会2009年医学遗传学年会)
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目的 研究αB-晶体蛋白基因R11H突变导致先天性白内障的分子机制。方法 利用基因重组技术将野生型及R11H突变型人αB-晶状体蛋白基因(CRYAB)克隆到原核表达载体pET 28a(+)上,将重组子转化大肠杆菌,通过IPTG诱导在大肠杆菌BL21中表达。通过载体自身所带6×His标签,利用Ni-NTA纯化出相应的重组蛋白。通过Westem Blot对所表达的蛋白进行鉴定。应用圆二色光谱、内部色氨酸荧光光谱等技术分析αB-晶状体蛋白的构象和结构的变化。以疏水性荧光物质8,8-二苯胺基-5,5-二磺酸联萘(bis-ANS)为探针应用荧光光谱技术分析αB-晶状体蛋白疏水性表面的变化情况。
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