【摘 要】
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本实验利用RT-PCR方法扩增出IPNV-ZYX分离株主要结构蛋白VP2的抗原表位区基因(616 bp),命名为IPNV VP2 COE,将其克隆到pCold TF表达载体中构建重组质粒pCold TF-VP2 COE,
【机 构】
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东北农业大学动物科学与技术学院,哈尔滨150030
【出 处】
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2013年中国水产学会鱼病专业委员会学术研讨会
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本实验利用RT-PCR方法扩增出IPNV-ZYX分离株主要结构蛋白VP2的抗原表位区基因(616 bp),命名为IPNV VP2 COE,将其克隆到pCold TF表达载体中构建重组质粒pCold TF-VP2 COE,转化于大肠杆菌BL21 (DH5α)进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳分析,表达蛋白约78 kD,用镍离子亲和层析柱纯化该蛋白,制备抗血清。间接ELISA结果显示,鼠抗VP2 COE蛋白血清与IPNV (ATCCVR-1318)细胞培养物发生特异性反应,效价为1∶12800；间接免疫荧光结果显示,鼠抗VP2 COE血清可与黑龙江某渔场已知感染IPNV虹鳟肝组织产生特异性的荧光。
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